非特异性干扰致D-二聚体假性升高引发流产1例.pdf

1、非特异性干扰致 D-二聚体假性升高引发流产 1 例应潇颖杨萍金先富陈超超毕晓洁【关键词】D-二聚体；乳胶凝集；非特异性干扰；静脉血栓栓塞D-二聚体是交联纤维蛋白的特异性降解产物之一，健康人体内含量非常低。当血浆中 D-二聚体升高时，凝血与纤溶途径同时被激活，D-二聚体可作为高纤溶的分子标志物。D-二聚体在各种病理情况都会升高，如肺栓塞、深静脉血栓、妊娠高血压、严重炎症、恶性肿瘤和弥散性血管内凝血（DIC）。由于 D-二聚体特异性低、敏感性高，可用于排除静脉血栓栓塞。以底物与抗原-抗体复合物结合的特征进行 D-二聚体的定量检测临床广泛应用，包括常用的乳胶凝集法、胶体金免疫色谱法、免疫荧光法、酶联

2、免疫吸附试验等。人体中的非特异性物质可干扰免疫分析中的分析物与试剂抗体之间的反应，影响实验结果，如异嗜性抗体、人抗小鼠抗体、类风湿性因子或其他未知蛋白1。本文报道 1 例非特异性干扰引起的 D-二聚体假性升高而导致流产的病例，以期提高临床医生对 D-二聚体检测的重视程度。1病历摘要患者，女，32 岁，于 2021 年 9 月在外省医院进行二胎产前检查，实验室检查结果仅显示 D-二聚体水平异常升高，为 26.0 mg/L（参考范围 0 0.5 mg/L）。在第一次测定后 5 天内，使用相同的检测试剂盒与 SYSMEXCA-510 全自动血凝分析仪复检两次，D-二聚体均大于20 mg/L，而静脉血

3、栓形成的诊断截止值为 0.5 mg/L。经过一段时间的治疗，在同一家医院再次检测 D-二聚体仍保持在较高水平，D-二聚体大于 20 mg/L。外周血细胞计数、血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、类风湿因子（RF）、肌钙蛋白 I、C 反应蛋白等均在正常范围，详见表 1。进一步完善检查，排除肺栓塞、深静脉血栓、妊娠高血压、严重炎症、恶性疾病、DIC 等疾病。孕妇最终选择终止妊娠，人工流产后医生建议服用磺达肝素，多次随访 D-二聚体仍大于 20 mg/L。2022 年 2 月，患者就诊于我院血液内科，D-二聚体水平为 0.23 mg/L（表 1）。我院使

4、用 STAGOSTA-R 全自动血凝分析仪与 LiatestD-Di 检测试剂盒，一种自动乳胶增强型免疫分析，其对静脉血栓形成的诊断临界值也为 0.5 mg/L。由于两个检测结果不一致，我院使用 SYSMEXCA-510 全自动血凝分析仪对相同样本进行D-二聚体复检，结果为 28 mg/L；而纤维蛋白降解产物（FDP）在两台仪器上均显示处于正常范围内。患者入院前 3 年分娩第一个孩子，妊娠及分娩过程顺利。2讨论在病理条件下，凝血及纤溶系统的平衡被破坏，凝血倾向增强，导致 D-二聚体水平升高。临床指南强调D-二聚体在预测术后早期活动性静脉血栓栓塞并发症中的作用2，其动态水平可反映患者体内的高凝状

5、态，为临床提供诊断依据。正常妊娠的高凝状态为分娩做准|病例报告|作者单位：317000临海，温州医科大学附属台州医院检验科通信作者：毕晓洁，Email：表 1患者不同时期实验室检测结果项目2021-092022-02参考范围项目2021-092022-02参考范围白细胞计数（109/L）9.619.534.00 10.00RF（U/mL）1619 40红细胞计数（1012/L）4.814.753.90 5.20PT（s）12.512.311.5 13.5Hb（g/L）135136120 160APTT（s）38.637.428 44血小板计数（109/L）380356150 400FIB（g/

6、L）3.53.62.0 4.0胆红素（mg/dL）0.81.00.1 1.1D-二聚体（mg/L）260.230.5肌酐（mol/L）879544 97FDP（mg/L）0.345.0乳酸脱氢酶（U/L）350258250 500抗凝血酶（%）10080 120谷草转氨酶（U/L）35280 40蛋白质 C（%）9980 120谷丙转氨酶（U/L）32300 40纤溶酶原（%）10080 120肌钙蛋白 I（g/L）0.52.6 245C 反应蛋白（mg/L）0.8 0.8 0.852|病例报告|中国乡村医药 2023 年 9 月第 30 卷第 18 期乡村医药202318正文.indd522

7、023/9/814:45:16备，D-二聚体水平随着胎龄的增长缓慢增加3。异常高凝可导致妊娠高血压和静脉血栓栓塞，其 D-二聚体水平显著增加。监测孕妇血浆 D-二聚体水平并结合其他检测指标，可为妊娠期严重疾病的诊断提供依据，协助临床医生及时采取治疗措施，改善母婴预后。乳胶凝集法测定 D-二聚体的含量，原理是在乳胶颗粒上包裹 D-二聚体单克隆抗体，可捕获 D-二聚体作为特异性抗原。当 D-二聚体与这些单克隆抗体发生反应时，抗体致敏的乳胶颗粒聚集，血凝分析仪根据聚集强度计算 D-二聚体的水平。非特异性抗体可与高水平的抗体结合，从而致敏乳胶颗粒引起非特异性凝集，干扰检测结果。本例患者 D-二聚体 2

8、0 mg/L，虽然及时进行了一段时间的抗凝治疗，但在两台不同的血凝分析仪上检测到的相反结果，不能用疾病的进展来解释。患者体内无潜在因素可致 D-二聚体水平升高，如 DIC、高纤溶蛋白溶解、恶性肿瘤、创伤或手术伤口等。临床医生应考虑是否有干扰存在，可能导致错误的结果。笔者认为可通过在 SYSMEXCA-510 全自动血凝分析仪上做 D-二聚体的平行稀释试验来证实，D-二聚体水平在存在非特异性干扰的情况下显示出非线性。平行稀释试验的结果见表 2。仅少数报告研究这种非特异性干扰，如异嗜性抗体和人抗小鼠抗体等干扰已发表。ROUVIRE 等4报告1 例年轻女性提示肺栓塞，通过 STAGOSTA-R 全自

9、动血凝分析仪检测 D-二聚体为 2.79 mg/L；而采用三明治法（自动酶联荧光免疫检测系统）D-二聚体低于临界值（0.5 mg/L），但在患者血清中检测到人抗小鼠抗体。另一个病例中，患者的 D-二聚体血浆水平在血小板功能分析仪（INNOVANCE）检测值为 3.4 mg/L，而在HemosIL 仪器上 D-二聚体的检测结果在参考范围内，也是由于人抗小鼠抗体干扰导致5。Cappy 等6报告 1 例37 岁女性，因体内存在异嗜性抗体致血清抗缪勒激素水平错误升高。STAGOSTA-R 全自动血凝分析仪配套 LiatestD-Di检测试剂盒乳胶颗粒上有两种类型的 D-二聚体抗体，而INNOVANCE

10、 仪器配套检测试剂盒上只有一种抗体。笔者推测两种检测试剂盒之间的差异可用不同的单克隆表位类型来解释，两种检测试剂盒都含有异嗜性抗体阻滞剂和射频阻滞剂，但不可能在所有检测中阻断任何潜在的干扰抗体类型，特别是在高水平上。总之，一个未知的非特异性的干扰应采取不同仪器、不同检测方法加以验证，以确保结果的准确性。遇到检测结果异常升高时，应考虑存在干扰的可能性，从而减少不必要的检查，规避不正确的诊断。但仅少数医务人员注意到这些条件对 D-二聚体检测的影响，特别是没有更好的方法来确认干扰因素的存在。综上所述，了解干扰的存在是最基本的，当出现免疫分析结果与临床特征或其他放射学检查结果不一致时，要高度怀疑该检测

11、结果的准确性，临床医生和实验室人员之间的有效沟通也可避免假阳性结果的产生。参 考 文 献1 TOSETTO A，IORIO A，MARCUCCI M，et al.Predictingdisease recurrence in patients with previousunprovoked venous thromboembolism:a proposedpredictionscore（DASH）J.JThrombHaemost，2012，10（6）：1019.2 EMERSON J F，NGO G，EMERSON S S.Screening forinterferenceinimmunoas

12、saysJ.ClinChem，2003，49（7）：1163.3 YUANX，GAOY，ZHANGM，etal.AssociationofmaternalD-dimerlevelinlatepregnancywithbirthoutcomesinaChinesecohortJ.ClinChimActa，2020（501）：258.4 ROUVIRE J A，DEVIGNES J，DE MAISTRE E，et al.DiscrepancybetweentwomethodsofD-dimersmeasurement:onecaseofhumananti-mouseantibodyinterfer

13、enceJ.AnnBiolClin（Paris），2008，66（4）：441.5 MOOREMP.d-DimertestingfortheexclusionofvenousthromboembolisminpregnancyJ.InternMeDJ，2018，48（8）：1013.6 CAPPYH，PIGNYP，LEROY-BILLIARDM，etal.Falselyelevated serum antimllerian hormone level in acontext of heterophilic interferenceJ.FertilSteril，2013，99（6）：1729.（

14、收稿：2022-07-13）（本文编辑：张戈薇）表 2SYSMEX CA-510 平行稀释试验中的 D-二聚体水平样本（L）稀释液 STA-ROwren-Koller（L）稀释比D-二聚体实际值（mg/L）D-二聚体理论值（mg/L）样本（L）稀释液 STA-ROwren-Koller（L）稀释比D-二聚体实际值（mg/L）D-二聚体理论值（mg/L）1000028.028.0502501 515.04.750501 125.614.0503001 612.54.0501001 223.39.3503501 76.53.5501501 320.17.0504001 82.53.1502001 415.75.6504501 90.232.853|病例报告|中国乡村医药 2023 年 9 月第 30 卷第 18 期乡村医药202318正文.indd532023/9/814:45:16