1、临床常用免疫学检查 简述免疫应答 n天然免疫（natural immunity）：有生理 屏障结构、血液及组织液中吞噬细胞和 嗜酸粒细胞及自然杀伤细胞（NK）、天 然存在的抗微生物分子。特点是天然存 在，对外源微生物无特异区分，也不因 外源微生物侵入而加强。 获得性免疫或特异性免疫 acquired /specific immunity n由接触外源性物质而诱生，并特异性针 对不同大分子。特点是须有外源物质诱 生，能对外源物质进行区分并有记忆， 且随再次接触某一大分子物质而增强。 特异性免疫由抗原（antigen）、淋巴细 胞（lymphocyte）及抗体（antibody）和 淋巴因子（cy
2、tokine）组成。免疫应答为 特异性免疫所特有。 n 抗原（antigen Ag）：能刺激机体产生 免疫应答，并能与免疫应答产物特异性 结合的物质。异物性、分子大小、分子 结构决定物质是否有抗原性及抗原性大 小。 n抗体（antibody Ab）：机体受抗原刺激 后，血清和组织液中出现的一类与该抗 原发生特异结合的物质。 免疫学检测常用方法 n凝集反应 n沉淀反应 n溶血实验 n放射免疫 n荧光免疫 n酶免疫 n发光免疫 n流式细胞仪 一、血清免疫球蛋白（Ig）测定 1. Ig减低 见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷 、联合免疫缺陷的病人及长期使用免疫抑制剂的患者 。 2. Ig单克隆性增高
3、 仅有某一种Ig增高而其他Ig不 增高。主要见于免疫增殖性疾病。原发性巨球蛋白 血症， IgM升高。多发性骨髓瘤：分为IgG、IgA、 IgE、IgD型。 IgE升高见于过敏性皮炎、外源性哮 喘及某些寄生虫感染。 3. Ig多克隆性增高 表现为IgG、IgA、IgM均增高 。常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以 及系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾 病。 二、血清补体的检查 （一）总补体溶血活性（CH50）测定 主要反映补体经典激活途径的活化程度。 1. CH50增高 见于各种急性炎症、组织损伤 和某些恶性肿瘤等。 2. CH50减低 补体成分大量消耗：血清病、链球菌感染后
4、肾小球肾炎、自身免疫性溶血性贫血、 类风湿性关节炎及同种异体移植排斥反应。 补体大量丢失：外伤、手术和大失血。 补体合成不足：肝硬化、慢性肝炎和重型肝 炎。 （二）血清C3测定 无论经典途径还是旁路途径C3都参与，可反 映出补体的活化情况。 C3增高 各种急性炎症、传染病早期、 某些恶性肿瘤（以肝癌最明显）及排异反应等。 C3降低 肾炎的病因鉴别：链球菌感染肾炎血清C3减 少，病毒性肾炎血清C3含量正常。 免疫性疾病进展期：SLE， 膜增殖性肾炎等。 T、B淋巴细胞检测 n免疫细胞指一群参与免疫应答的细胞:第 一类指在免疫应答过程中起核心作用的淋巴样 细胞，如T、B淋巴细胞。第二类为抗原呈促进
5、 淋巴细胞作用的单核-巨噬细胞系统。第三类为 以其它方式参与免疫应答的有关细胞。 n族分化抗原（Cluster of differentiation): 细胞在发育分化过程中，表面抗原发生变化， CD抗原即指细胞变化过程中产生的抗原。目 前临床CD4（TH）与CD8（TS）检测应用广 泛。 T细胞检测（Thymus dependent lymphcyte 胸腺依赖淋巴细胞） 1 E玫瑰花试验 （Erythrocyte rosette formation test） 所得的百分率基本上代表了T细胞占淋 巴细胞的百分率。数量升高见于自身免疫性疾 病及器官移植排斥反应等，降低见于免疫缺陷 性疾病等。
6、 E玫瑰花试验只反映TC的数量，而不能体现 其功能，又由于检测要求高，目前临床很少应 用。 T淋巴细胞转化试验 n 抗原或非抗原刺激 （PHA 、 ConA 、PWA) T细胞 淋巴母细胞 转化率降低，见于细胞免疫 缺陷或细胞免疫功能低下患者。 实验要求相当高，一般实验室很 少作检测。 n转化的淋巴细胞 *100% n转化和未转化淋巴细 胞 n转化 率 = 2T细胞分化抗原测定 T细胞膜表面分子具有不同的抗原性，主要有 CD2 、CD3、 CD4、 CD8 等。 （1）CD3分子:表达于所有成熟的T淋巴细胞 表面，T细胞特有标志，反映T细胞总数的变化。 降低见于：免疫缺陷性疾病，如AIDS 升
7、高见于：甲亢、慢性淋巴细胞性甲状腺炎等。 （2） CD4分子:辅助性T细胞（Th）表达。 降低见于：某些感染性疾病，如AIDS 升高见于：类风湿性关节炎活动期。 n（3）CD8分子:是抑制、杀伤性T细胞的标志 。 n降低见于：类风湿关节炎、重症肌无力。 n升高见于：传染性单核细胞增多症、巨细胞病 毒感染。 n （4） CD4/ CD8比值:降低提示免疫抑制; 升高提示亢进,免疫性疾病。 n降低见于：类风湿关节炎、重症肌无力。 n升高见于：传染性单核细胞增多症、巨细胞病 毒感染。 B淋巴细胞检测 nEA玫瑰花试验 n反映外周血B淋巴细胞的百分率。 （二）B细胞免疫检测 B细胞膜表面免疫球蛋白（S
8、mIg）测定 SmIg是B细胞的特征表面标志。早期的前B 细胞表达IgM，成熟的B细胞表面IgD、IgM或 IgA、IgE等。 主要用于检测外周血B淋巴细胞的百分率。 SmIg阳性细胞降低，见于体液免疫缺陷性疾 病； SmIg阳性细胞增加，见于淋巴白血病、多毛 白血病、巨球蛋白血症等。 2B细胞分化抗原测定 CD19 、CD20 、CD22。 其中CD19是最重要的B细胞标记分子。升 高见于B细胞系统的恶性肿瘤；CD19细胞降低 见于体液免疫缺陷病及使用化疗或免疫抑制剂 后。 四、感染免疫检测 （一）链球菌溶血素“O”（ASO）测定 抗链球菌溶血素“O”是机体感染溶血性链 球菌后产生的相应抗体
9、，升高提示曾有溶血性 链球菌感染，不一定是近期感染的指标。 正常人ASO500U。 ASO升高常见于A群溶血性链球菌感染及 感染后免疫反应所致的疾病，如感染性心内膜 炎及扁桃体炎，风湿热、链球菌感染后急性肾 小球肾炎等。 （二）伤寒与副伤寒的血清学检查 肥达（Widal）反应 检测伤寒抗体。参考值：“O”凝集价1：80； 鞭毛抗原“H”凝集价1：160；副伤寒杆菌甲、乙 、丙的鞭毛抗原“A”、“B”、“C”凝集价1：80。 在病程中逐周复查，若抗体效价依此递增或恢 复期较急性期升高4倍或以上，则有诊断意义。“O” 、“H”均升高则伤寒感染的可能性大；若“O”升高而 “H”不升高，则可能是伤寒类
10、感染的早期；若“H”升 高而“O”不升高，则有可能是预防接种或是非特异 性的“回忆反应”。 酶联免疫吸附试验（ELISA） 特异性 IgM抗体，伤寒早期诊断。vi抗体伤寒带菌者。 胶乳凝集试验（LAT） 检测伤寒沙门菌“ i”、“H”、“O”抗原，早期诊断。 （三）结核杆菌抗体（TB-Ab）和DNA测定 结核杆菌抗体阳性，表示有结核分枝菌感染 ，其灵敏度超过90%、特异性超85%，比传统的 痰涂片和细菌培养方法简便、快捷、灵敏。聚合 酶链反应（PCR）检测DNA特异性更强、灵敏度 更高，但应防止污染引起的假阳性。 （四）幽门螺杆菌抗体（HP-Ab）测定 HP-Ab阳性见于胃、十二指肠幽门螺杆菌
11、感 染，如胃炎、消化性溃疡等，其敏感性大于90% ，特异性为85%。HP-Ab阳性也可见于胃癌和胃 黏膜相关性淋巴样组织淋巴瘤。 （五）汉坦病毒（HTV）抗体IgM测定 抗-IgM是感染HTV后早期出现于患者血清 中的一种特异性抗体。有助于诊断肾综合征出 血热。 （六）流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定 流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定，有助 于乙型脑炎的早期诊断。 （七）寄生虫感染免疫检测 弓形虫抗体和DNA测定 IgM型弓形虫抗体升高是近期感染的指标， IgG型弓形虫抗体增高是既往感染的指标。DNA 阳性对弓形虫病的诊断意义更大。 日本血吸虫抗体测定 机体感染日本血吸虫后可产生特异性抗体。
12、在血清中检出特异性IgM、IgG和IgE抗体，有利 于临床诊断和流行病学的调查。 3.囊虫抗体测定 囊虫是一种人和猪共患的寄生虫病 。感染囊虫后，可在血清和脑脊液中出 现特异gG抗体，其特异性和敏感性较 高。 4.疟原虫抗体和抗原测定 疟原虫抗体阳性提示近期有疟原虫 感染，抗原检测或血液涂片找原虫即可 确诊。 （八）梅毒血清学检查 非特异性抗体（反应素）检测为定性试验， 梅毒的初筛，非特异性。 特异性抗体检测有助于梅毒的确诊。 （九）艾滋病病毒抗体及RNA测定 感染HIV数周到半年后，患者体内可出现抗- HIV抗体。检测抗-HIV抗体有助于艾滋病的诊断 。 初筛试验敏感性高但特异性差。 确诊试
13、验有利于确诊和早期诊断。 五、肿瘤标志物检测 肿瘤标志物是指能够区分肿瘤或非肿瘤的化 学物质，包括肿瘤抗原、激素、受体、酶与同工 酶、癌基因及其产物等百余种。 血清甲胎蛋白（AFP）测定 癌胚抗原（CEA）测定 癌抗原125（CA125）测定 癌抗原15-3（CA15-3）测定 糖类抗原CA199测定 组织多肽抗原（TPA）测定 前列腺特异抗原（PSA）测定 （一）血清甲胎蛋白（AFP）测定 参考值：血清25ug/L（25ng/ml ） 临床意义 1.AFP是目前诊断肝细胞癌最特异的标志物 ，高于300ug/L 诊断阈值。 2.病毒性肝炎、肝硬化时，随着受损肝细胞 的修复再生，幼稚化的肝细胞重
14、新具有产生AFP 的能力，但常低于200ug/L。 3.妊娠及其他亦可高。 （二）癌胚抗原（CEA）测定 恶性肿癌患者的血清中可发现CEA含量异常 升高。常用于诊断消化器官的癌症（结肠癌、胃 癌、胰腺癌、转移性肝癌等）。 （三）癌抗原125（CA125）测定 CA125为一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在 于卵巢肿瘤的上皮细胞内，主要用于辅助诊断恶 性浆液性卵巢癌等。 （四）癌抗原15-3（CA15-3）测定 CA15-3是一种乳腺癌相关抗原，对乳腺癌的 诊断及术后随访临测有一定的价值。 糖类抗原CA199测定 n参考值 37U/ml 临床意义：对胰腺癌有较高的敏感度及特 异性。 （五）组织多肽抗
15、原（TPA）测定 TPA是一种非特异性肿瘤标志物，血清 中TPA增高主要用于辅助诊断迅速增殖的恶 性肿瘤，且在恶性肿瘤的疗效观察方面敏感 性较高。 （六）前列腺特异抗原（PSA）测定 PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋 白酶，在前列腺癌时，前列腺腺管破坏导致 血清PSA水平明显升高。 六、自身抗体检查 类风湿因子（RF） 抗核抗体（ANA） 抗双链DNA抗体 抗RNP抗体 抗Sm抗体 狼疮细胞（LE细胞）检查（page289） 抗线粒体抗体（AMA） 抗甲状腺球蛋白抗体（ATG） 抗甲状腺微粒体抗体（ATM） 抗平滑肌抗体（ASMA） （一）类风湿因子（RF）检查 RF是一种以变性IgG为靶
16、抗原的自 身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患 者的血清和关节液中。 1. 类风湿性关节炎阳性且滴度较高。 2.其他：SLE、硬皮病、皮肌炎，感 染性疾病，正常老年人。 （二）抗核抗体（ANA）的检查 抗核抗体（ANA）是以细胞的核成分为靶 抗原的自身抗体的总称，无器官及种族特异性。 阳性主要见于系统性红斑狼疮（SLE）。 抗双链DNA抗体是SLE的活动性标志。 可提取性核抗原（ENA）抗体谱，主要包括 抗RNP抗体和抗Sm抗体，用以诊断自身免疫性 疾病。抗Sm抗体为SLE所特有；抗RNP抗体阳 性主要见于混合性结缔组织病。 狼疮细胞（LE细胞）检查阳性，主要见于 未经治疗的SLE病人。 （三）
17、抗组织和抗细胞浆抗体检测 抗线粒体抗体（AMA）是一组以 线粒体为靶抗原的自身抗体，主要是IgG。阳性 主要见于原发性胆汁性肝硬化。 抗甲状腺球蛋白抗体（ATG）是 诊断甲状腺自身免疫性疾病的一个特异性指标。 抗甲状腺微粒体抗体（ATM）阳 性主要见于桥本甲状腺炎。 抗平滑肌抗体（ASMA）阳性主要 见于自身免疫性肝炎（如狼疮性肝炎）、原发性 胆汁性肝硬化、急性病毒性肝炎等。 七、循环免疫复合物（CIC）测定 免疫复合物（IC）是抗原抗体相结合的 产物。测定CIC对免疫复合物疾病的诊断、疗 效观察、预后判断，均有重要意义。 CIC为非特异性诊断指标，阳性可见于自 身免疫性疾病、急性链球菌感染手
18、肾炎、乙 型病毒性肝炎、感染性心内膜炎、麻风等。 八、C反应蛋白（CRP）测定 C反应蛋白是肝脏合成的一种能与肺炎链球菌 胞壁上的C多糖体起沉淀反应的急性时相蛋白质。 早期诊断某些疾病：各种急性化脓性炎症 、菌血症、组织坏死、恶性肿瘤、结缔组织疾病 鉴别功能性疾患与器质性疾患 风湿热等疾病的动态观察 区分细菌感染与病毒感染 CRP与血沉 复习思考题 n填充题 n人体血清中免疫球蛋白含量最高的为（ ）免疫球蛋白。 n过敏性疾病常发现（ ）免疫球蛋白增高。 nM蛋白是由（ ）细胞分化而来的浆细胞异常增生，导致血液或尿 液中现的大量结构一致的免疫球蛋白或轻链或重链。 n白细胞分化抗原CD4代表（ ）淋巴细胞。 n丙型肝炎病毒（HCV）是一种（ ）核酸类型的病毒，乙型肝炎 病毒（HBV）是一种（ ）核酸类型的病毒。 n伤寒杆菌检测“肥达氏反应”参考值为TO （ ），TH （ ） 。 n肾小球肾炎、自身免疫性疾病等通常会引起总补体检测（CH50 ）活性（ ）。 n原发性肝细胞性患者血清AFP检测呈增高，临床诊断阈值为超过 （ ）ug/L。 n免疫球蛋白A（IGA），分为血清型与（ ）。 n 临床检测梅毒感染有非特异定性试验和特异性试验如（ ）试验 。 (鵷洼泓域咨询MACRO/ 脂肪酶投资建设项目立项申请报告脂肪酶投资建设项目立项申请报告一、项目建设必要性1、近年来，项目承办单位
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