1、固醇(-sitosterol)为最多。 酵母含麦角固醇(ergosterol) 。 61 （一）胆固醇是含有羟基的固体醇类化合物 胆固醇仅含一个亲水性的羟基 ，疏水性极强，不溶 于水而溶于非极性溶剂。 胆固醇熔点较高(149)，在常温下以固态形式存 在。 62 （二）胆固醇的羟基酯化为胆固醇酯 63 二、胆固醇是细胞膜的基本结构成分 胆固醇是动物细胞膜的基本结构成分之一，但亚细 胞细胞器(subcellular organelle)膜含量较少。 胆固醇因含环戊烷多氢菲环使得其比细胞膜中其他 脂质成分更强直(rigidity)。因此，胆固醇是决定细 胞膜性质的一种重要分子。 64 三、胆固醇可转
2、化为一些具有重要 生物学活性的固醇类化合物 （一）胆固醇可转化为类固醇激素 人体内利用胆 固醇为原料合 成的主要类固 醇激素 器 官合成的类固醇激素 肾上腺 皮质球状带醛固酮 皮质束状带皮质醇 皮质网状带雄激素 睾丸 间质细胞睾丸酮 卵巢 卵泡内膜细胞雌二醇、孕酮 黄体 65 （二）胆固醇可转变为胆汁酸 胆固醇在体内代谢的主要去路是在肝细胞中转化成 胆汁酸(bile acid) ，随胆汁经胆管排入十二指肠。 胆汁酸具有促进脂类消化与吸收、抑制胆汁中胆固 醇的析出等作用。 66 （三）胆固醇可转化为一些具有重要 生物学活性的固醇类化合物 胆固醇 7-脱氢胆固醇 皮肤 维生素D3 紫外线 胆钙化甾
3、醇(cholecalciferol) 67 第五节 脂类提取分析技术 Extraction and Analysis of Lipids 68 一、脂的分离分析需要某些特殊技术 分析脂质在体内的分布及其含量可探索和了解脂质 在生理、病理生理过程中的作用。 分析脂质时，往往采用一些在分析蛋白质、核酸和 碳水化合物等水溶性分子所不常用的方法和技术 。 69 分析脂质一般程序： 有机溶剂分离酸、碱或酶处理色谱法分析 70 二、脂提取需要有机溶剂 脂类为非极性有机化合物，不溶于水，需用有机 溶剂进行提取。 不同的脂类用不同有机溶剂： 中性脂用极性较小的有机溶剂的进行提取 膜脂用极性较大的有机溶剂 如：
4、乙醚、氯仿、苯 如：乙醇、甲醇 71 脂质提取采用的一般方法： 组织匀浆 萃取 氯仿/甲醇/水 (1:2:0.8，v/v/v) 静置 出现分层 下层液 进一步分离和分析 甲醇/水相：蛋白质、碳水化合物等水 溶性分子 氯仿相：有被提取的脂质等非水溶性分子 72 三、吸附色谱法可根据极性将 不同的脂分离 吸附色谱法（adsorption chromatography）原理 脂质通过分离介质时，因脂质极性的不同，导致与 固定相吸附能力的差异，当流动相洗脱时移动速度不一 而分离。 固定相为硅胶 （silica gel） 流动相为氯仿 极性较高的脂质与硅胶的结合比非极 性高的脂质紧密，氯仿洗脱时，混合
5、脂质中的非极性脂质移动速度大于极 性较高的脂质而分离。 73 吸附色谱分析常用的两种方法： 柱层析 将硅胶装在层析柱中，待分离的脂质加样于 硅胶顶部。 薄层层析（thin-layer chromatography, TCL） 将硅胶铺层于玻片上，待分离的脂质加样于 硅胶一端，加样端与分离液氯仿接触，通过虹吸 作用，氯仿从加样端向另一端移动 。 74 四、气-液色谱法可分析挥发性 脂衍生物的混合物 原理： 根据脂酸衍生物混合物在柱中的吸附性质和沸 点的不同，极性越小的脂酸衍生物随气相先流 出。 对象： 不同链长和不同不饱和度脂酸的混合物。 阶段： 1.组织脂质的粗分离； 3.通过气相色谱仪进行气
6、化和分析。 2.将待分离、分析的脂质进行转变成可进行气 化反应的化合物； 75 以分析磷脂中脂酸为例： 磷脂标本中加 入甲醇/HCl或 甲醇/NaOH混 合液 加热后脂酸与 其结合的酯键 断裂，转变成 脂酸甲基酯 将脂酸甲基酯填 料于气液相色 谱柱中，通过加 热使柱中的脂酸 甲基酯气化 流动相（惰性气 体，如氦气）气 流通过色谱柱 分离，极性越小 的脂酸衍生物随 气相先流出 76 五、特殊的水解方法有助于 脂质结构的分析 在分析脂质的过程中，往往需要对脂质分子的组成成分 进行结构分析，需将脂类中特定部位的组份水解，结合 薄层层析、气相色谱、高压液相色谱(high pressure liquid chromatography, HPLC)等分析方法可明确被分析 脂类的结构。 方法： 稀酸和碱 强酸 酶解反应 甘油三酯、磷脂、固醇酯 （酯键） 鞘脂 （酰胺键） 特异的水解方法（如磷脂酶） 77 六、质谱法可用来分析脂的结构 质谱法(mass spectrometry)可明确被分析的脂酸的 碳氢链的长度、双键的数目及其位置乃至其构像 的差异 。 78 Water Homogenized in chloroform/methanol/ water NaOH/methanol Fatty acyl methyl esters 分 析 脂 质 一 般 程 序 示 意 图 目 录 79
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