1、)可见比色分析 可见比色分析法就是吸收光谱在可见光范围内的分光 光度法。可见光波长范围是由紫色的400nm到红色的 760nm。 随着分光光度计的发展，比色测定已由分光光度计代 替了旧时的比色计。分光光度计与比色计相比，具有准确 、省时、选择性好的优点，现代的分光光度计都具有扫描 功能，可以通过吸收曲线，找出被测物质的最佳吸收波段 ，还可以从吸收曲线上选择合适的条件，以减少杂质的干 扰。 63 农药的可见光比色分析有以下几种情况： 农药有效成分本身带有颜色，可以直接进行比色，这 种农药数量很少，如敌克松原药为黄棕色，在波长435nm 处有最大吸收峰。故可直接进行比色测定。 农药本身无色，经化学
2、反应，引入或生成一个显色基 团而变成有颜色的化合物，此过程称为“显色”，大多数农 药都需要显色，才能进行测定。 (1)经化学反应可以生成有色化合物，如对硫磷经碱解 后形成对硝基酚而呈黄色。五氯酚经氧化形成四氯代苯醌 呈黄色。 (2)引入显色基团生成有色化合物：如农药经酸、碱水 解产生酚类或芳胺，可与偶氮试剂进行偶合形成有色化合 物，偶氮试剂则称为显色剂。 64 1含氯农药的颜色反应 (1)吡啶碱显色反应(Fujiwara反应) 含卤素农药在碱性溶液中，与吡啶短时间加热，至少 有两个卤原子和一个碳原子成键，产生红色或蓝色。 如DDT与含有呫啐酚的吡啶溶液及氢氧化钾加热生成 红色。可在510 nm
3、处测定光密度。 三氯杀螨醇在碱性条件下，水解产生氯仿，氯仿在碱 吡啶作用下生成红色，可在535nm处测光密度。氯丹可 以产生紫色(404nm)，毒杀芬可产生黄色(400 nm)，七氯 、克菌丹、敌敌畏等都有此反应，反应过程中，含有水或 乙醇对颜色形成有干扰。 65 (2)硝化甲醇钠法；含氯芳香族农药，经硝化后加甲醇钠 ，形成四硝基衍生物，经分子重排变为醌式，呈蓝色。如 对位DDT、对位DDD及三氯杀螨醇形成蓝色(598nm)； DDE，DDA形成红色（420nm），邻位DDT形成紫色 (590511nm)。 66 六六六需加碱水解成l，2，4三氯代苯再经硝化与甲醇钠反 应形成6氯2，4二硝基间
4、苯二酚，呈黄色，可在415nm处测 定光密度。 67 (3)脱氯磺化显色反应： DDT，甲氧 DDT等在1乙醇氢氧化钾镕液中，脱 掉一分子氯化氢，再与浓硫酸反应，即呈现颜色，DDT为 桃红色；甲氧DDT为紫色。 (4)二苯胺氯化锌显色反应： 狄氏剂、毒杀芬等经与二苯胺、氯化锌混合熔融， 而形成蓝绿色化合物，将此化合物用丙酮或冰醋酸溶解， 即可进行比色。 (5)浓硫酸与铬变酸显色反应； 卤代苯氧乙酸类与浓硫酸反应产生甲醛，再与铬变酸 (1，8二羟萘、3，6二磺酸)加热到150出现紫色。 68 2含磷农药的颜色反应 (1)钼蓝比色法测全磷： 含磷农药用高氯酸及硫酸混合液，消化分解成无机磷 ，在酸性
5、条件下与钼酸铵及偏钒酸铵反应形成磷钼杂多酸 ，显黄色，在420 nm处测定光密度。 PO3312MoO423NH424H (NH4)3PO412MoO312H2O 如在钼酸铵中加入1氨基2萘酚4磺酸试剂或SnCl2 则显蓝色，在735nm处测定光密度，所有有机磷农药均可 用此法测定全磷含量。 69 (2) 4(对硝基苄基)吡啶(NBP)反应： 有机磷农药在乙醇中与4(对硝基苄基)吡啶在100 加热1217min，冷却后加入四乙撑戊胺丙酮液(或吗啉 丙酮液)30 min呈蓝色，在580 nm处测定光密度。此法可 测定马拉硫磷、乐果、倍硫磷等含硫或不含硫有机磷农药 。 70 (3)皂化比色法： 含
6、硝基有机磷化合物，碱解后，产生对硝基苯酚化合 物，呈黄色，可在420480nm波长范围内测光密度。如 对硫磷、甲基对硫磷、杀螟松均可用此法测定。 (4)与氯化钯反应： 含硫磷酸酯类在酸性条件下与氯化钯反应形成黄色或 褐色螯合物。二硫代磷酸酯形成11螯合物，一硫代形成 12螯合物。 71 (5)形成铜盐络合物： 二硫代磷酸酯类，在碱性条件下，水解成二烷基二硫 代磷酸，与铜离子在四氯化碳溶液中反应，呈黄绿色，在 420 nm下测定光密度。如马拉硫磷、甲拌磷、乙硫磷、 亚胺硫磷等均有此反应。但乐果无此反应，因乐果碱解后 生成硫代磷酸和硫醇： 72 3氨基甲酸酯类 氨基甲酸酯类农药经碱解后形成酚类与偶
7、氮试剂反应 形成重氮盐而显色。 甲萘威、克百威等经碱解后生成萘酚，与对硝基苯偶 氮氟硼酸的甲醇溶液反应，呈黄色，在590 nm处测光密 度或加入对硝基氯化重氮苯在酸性条件下呈黄褐色。 73 速灭威等经碱解后生成苯酚类，在弱酸下与对硝基氯 化重氮苯反应呈黄色。如在碱性条件下，则形成亮红色染 料可在490 nm处测定光密度。 74 4其它 (1)酚类的颜色反应：酚类化合物在微碱性溶液中与4氨 替比林及氧化剂的作用下，形成红色，在510520nm处 测光密度。 具有卤素、羧基、甲氧基等取代的酚类均有上述反应 ，五氯酚常用此法定量。 (2)福美双的颜色反应：福美双在酸性溶液中为 与Cu 2定量络合成铜
8、的络合物，在430 nm处测定光密度 。 75 (三)紫外光谱定量分析 农药的有效成分在紫外区(200一400nm)大多有特征吸 收，一些吸收不明显的农药，也可以通过适当的化学处理 转化成有吸收特征的物质，再加以分析。 1一些农药的紫外光谱 (1)有机氯农药 76 77 (2)苯醚类农药 78 79 (3)苯酯类农药： 80 81 表614 一些有机磷酸酯农药的最大吸收波长 名 称 max（nm） 硝基苯260 三位硝基苯磷酸264 乙基二位硝基苯磷酸267 氧磷268 硫磷274 243 二磷 247.5 82 (4)苯胺类农药 83 84 (5)均二嗪类农药： 表616 一些三嗪类农药的最大吸收波长 名 称 max（nm） 莠去通220 西通220 朴通220 西津222 莠去津222 朴津223 草达津 228 85 86 (6)吡啶类化合物： (7)其它：含唑类及咪唑类农药大多有很好的吸收峰，如三环唑、三 唑酮、多菌灵等都可用紫外光谱法进行定量测定。 87 2测定方法 (1)标准对照法：在同样条件下配制标准溶液及试样溶液， 在所选波长
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