性传播疾病及实验室诊断.ppt
《性传播疾病及实验室诊断.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《性传播疾病及实验室诊断.ppt(127页珍藏版)》请在文库网上搜索。
1、性传播疾病及其实验室诊断性传播疾病及其实验室诊断梅梅 毒毒梅毒螺旋体银染色梅毒螺旋体银染色梅毒螺旋体感染后人体的免疫梅毒螺旋体感染后人体的免疫体液免疫:体液免疫:特异性抗体:二期梅毒病人血清中产生特异性特异性抗体:二期梅毒病人血清中产生特异性抗梅毒螺旋体抗体,主要是抗梅毒螺旋体抗体,主要是IgM和和IgG,早期早期为为IgM和和IgG,晚期为晚期为IgG,可终生存在。可终生存在。梅毒螺旋体制动抗体也是一种特异性抗体梅毒螺旋体制动抗体也是一种特异性抗体(IgM),可终生存在可终生存在,它在厌氧有补体存在时,它在厌氧有补体存在时,此抗体能抑制活的梅毒螺旋体运动,并能杀死此抗体能抑制活的梅毒螺旋体运
2、动,并能杀死梅毒螺旋体。梅毒螺旋体。抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体,针对心磷脂的针对心磷脂的VDRL抗体主要是抗体主要是IgM,也有少量也有少量IgG,引起心磷脂抗体反应的引起心磷脂抗体反应的抗原可能是感染组织损伤使细胞的线粒体膜释抗原可能是感染组织损伤使细胞的线粒体膜释放出来放出来.抗梅毒螺旋体粘多糖抗体,可以抑制梅毒螺旋体抗梅毒螺旋体粘多糖抗体,可以抑制梅毒螺旋体繁殖,促使病灶愈合的重要因素。繁殖,促使病灶愈合的重要因素。血清中和因子,实验性梅毒免疫血清中含有一种血清中和因子,实验性梅毒免疫血清中含有一种能灭活梅毒螺旋体毒性的血清中和因子。能灭活梅毒螺旋体毒性的血清中和因子。梅毒螺旋体多肽抗体,
3、有梅毒螺旋体多肽抗体,有16种抗梅毒螺旋体多肽种抗梅毒螺旋体多肽的抗体,而当疾病进入隐伏晚期或晚期时,又特的抗体,而当疾病进入隐伏晚期或晚期时,又特异地丢失其中异地丢失其中4-5种抗体,这种特异性抗体丢失,种抗体,这种特异性抗体丢失,可能是造成疾病发展到晚期的条件。可能是造成疾病发展到晚期的条件。免疫复合物及免疫复合物及IgE和梅毒螺旋体结合。研究证明,和梅毒螺旋体结合。研究证明,梅毒病人血清中有免疫复合物,其中含螺旋体抗梅毒病人血清中有免疫复合物,其中含螺旋体抗原,梅毒病理中有循环免疫复合物的参与,梅毒原,梅毒病理中有循环免疫复合物的参与,梅毒治疗中的吉海反应,先天性梅毒和二期梅毒中肾治疗中
4、的吉海反应,先天性梅毒和二期梅毒中肾损害均和免疫复合物有关。损害均和免疫复合物有关。一期梅毒一期梅毒一期梅毒一期梅毒主要症状为硬下疳主要症状为硬下疳 硬下疳发生后硬下疳发生后1-21-2周梅毒血清试周梅毒血清试验变为阳性验变为阳性 7-87-8周时全部病例均为阳性周时全部病例均为阳性 血清试验阴性并不能排除一期梅血清试验阴性并不能排除一期梅毒,特别是病期不足两周者。毒,特别是病期不足两周者。二期梅毒二期梅毒二期梅毒的皮肤粘膜损害二期梅毒的皮肤粘膜损害 二期梅毒骨关节损害二期梅毒骨关节损害 二期梅毒眼损害二期梅毒眼损害 二期神经梅毒二期神经梅毒 二期复发梅毒二期复发梅毒 二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫
5、瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒玫瑰疹二期梅毒疹二期梅毒疹二期梅毒疹二期梅毒疹二期梅毒肛周扁平湿疣二期梅毒肛周扁平湿疣二期梅毒扁平湿疣二期梅毒扁平湿疣二期梅毒疹黏膜白斑二期梅毒疹黏膜白斑二期梅毒疹黏膜白斑二期梅毒疹黏膜白斑晚期梅毒(tertiary syphilis)三期梅毒皮肤损害三期梅毒粘膜损害晚期骨梅毒晚期眼梅毒晚期心血管梅毒晚期神经梅毒晚期内脏梅毒三期梅毒树胶肿三期梅毒树胶肿三期梅毒软腭陈旧性树胶肿形成上腭穿孔三期梅毒软腭陈旧性树胶肿形成上腭穿孔胎传梅毒早期胎传梅毒 2岁以内发病者为早期胎传梅毒 皮损与后天二期梅毒大致相似 口周有放射状
6、瘢痕为其特征 肛周及外生殖器部位亦可发生扁平湿疣 骨骼系统82%被损害 可出现内脏损害 皮肤粘膜梅毒 晚期胎传梅毒 眼梅毒 骨梅毒 神经梅毒 先天潜伏梅毒梅毒的实验室检查梅毒的实验室检查一、梅毒螺旋体检查一、梅毒螺旋体检查 暗视野显微镜检查:穿刺液,见有活动的暗视野显微镜检查:穿刺液,见有活动的梅毒螺旋体。在皮损处,用玻片刮取组织渗梅毒螺旋体。在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结出液或淋巴结免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。的梅毒螺旋体。活体组织检查梅毒螺旋体,如用银染色法活体组织检查梅毒螺旋体,如用银染色法(WarthinWarthin-
7、starry-starry)法或(法或(LevoaditisLevoaditis法法)或或荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐色,有螺旋结构,位于真皮毛细血管周围。色,有螺旋结构,位于真皮毛细血管周围。银染色的阳性结果需谨慎解释,因为类似梅银染色的阳性结果需谨慎解释,因为类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。而特异性荧光毒螺旋体的其他物质易混淆。而特异性荧光检查则更为可靠。检查则更为可靠。梅毒血清试验梅毒血清试验(一)非梅毒螺旋体抗原血清试验,用心磷(一)非梅毒螺旋体抗原血清试验,用心磷脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,亦称脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,亦
8、称反应素。反应素。性病研究实验室试验(性病研究实验室试验(Venereal Disease Venereal Disease Research Laboratory testResearch Laboratory test,VDRLVDRL););用心磷脂、用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原,可作定量及定性试验。卵磷脂及胆固醇为抗原,可作定量及定性试验。不加热血清反应素玻片试验(不加热血清反应素玻片试验(Unheated Serum Unheated Serum ReaginReagin USR USR)是是VDRLVDRL抗原的改良,敏感性及特异性抗原的改良,敏感性及特异性与与VDRLVDRL相
9、似。相似。快速血浆反应素试验(快速血浆反应素试验(Rapid Plasma Rapid Plasma reaginreagin test test,RPR RPR):):是是VDRLVDRL抗原的改良,敏感性及特异性与抗原的改良,敏感性及特异性与VDRLVDRL相似,优点是肉眼即可读出结果。相似,优点是肉眼即可读出结果。RPRRPR(二)(二)梅毒螺旋体抗原血清梅毒螺旋体抗原血清试验:用活的或死:用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋定抗螺旋体抗体。体抗体。荧光梅毒螺旋抗体吸收光梅毒螺旋抗体吸收试验(FTA-ABS TestFTA-ABS Test):):
10、此此法是法是较敏感和敏感和较特异的螺旋体特异的螺旋体试验。梅毒螺旋体血凝梅毒螺旋体血凝试验(TPHATPHA):):敏感性和特异性均敏感性和特异性均高,操作高,操作简便,但便,但对一期梅毒不如一期梅毒不如FTA-ABSFTA-ABS试验敏敏感。感。梅毒螺旋体制动试验(梅毒螺旋体制动试验(Treponema Pallidum immobilization,TPI););用用Nichol株螺旋体(活的)株螺旋体(活的)加病人血清(含抗体)后,在补体的参与下可抑制加病人血清(含抗体)后,在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。如螺旋体的活动。如50%梅毒螺旋体停止活动,则梅毒螺旋体停止活动,则为阳性。此试
11、验特异性、敏感性均高,但设备要求为阳性。此试验特异性、敏感性均高,但设备要求高,操作难,仅供研究用。高,操作难,仅供研究用。TPHATPHA三、基因诊断技术检测梅毒螺旋体三、基因诊断技术检测梅毒螺旋体(一)(一)PCRPCR引物的引物的设计部位与序列:部位与序列:目前有四套目前有四套扩增梅毒螺旋增梅毒螺旋体体DNADNA的系的系统:扩增增4747KDaKDa膜抗原基因(膜抗原基因(tpp47tpp47基因),基因),扩增增3939KDaKDa碱性膜蛋白基因碱性膜蛋白基因(bmpbmp基因),基因),扩增增TpF1TpF1蛋白基因蛋白基因(tpf-1tpf-1)或或TyF1TyF1蛋白基因(蛋白
12、基因(tyf-1tyf-1)和和扩增增tmpAtmpA基因。基因。47-1 47-1 CACAATGCTCACTGAGGATAGT CACAATGCTCACTGAGGATAGT 648-669 648-669 47-2 ACGCACAGAACCGAATTCCTTG 47-2 ACGCACAGAACCGAATTCCTTG 1284-1035 1284-1035 Tpp47-3 TTGTGGTAGACACGGTGGGTAC 713-734 Tpp47-3 TTGTGGTAGACACGGTGGGTAC 713-734 47-4 TGATCGCTGACAAGCTTAGGCT 1187-1208 47-
13、4 TGATCGCTGACAAGCTTAGGCT 1187-1208 TP3 CAGGTAACGGATGCTGAGT 256-275 TP3 CAGGTAACGGATGCTGAGT 256-275 TP4 CGTGGCAGTAACCGCAGTCT 762-741 TP4 CGTGGCAGTAACCGCAGTCT 762-741 bmpTP5bmpTP5(探探针)GACCTGAGGACTCTCAAATC 500-519 GACCTGAGGACTCTCAAATC 500-519 TP7 CTCAGCACTGCTGAGCGTAG 172-191 TP7 CTCAGCACTGCTGAGCGTAG 17
14、2-191 TP8 AACGCCTCCATCGTCACACC 788-769 TP8 AACGCCTCCATCGTCACACC 788-769 TF1 CTCTTCAAGGAGCTCAT 222-206 TF1 CTCTTCAAGGAGCTCAT 222-206 Tpf-1F2 AGACAGTGGTTATGCTC 77-61 Tpf-1F2 AGACAGTGGTTATGCTC 77-61 或或tyf-1F3(tyf-1F3(探探针)ATTGCGCCAGCATGTAG 114-130 ATTGCGCCAGCATGTAG 114-130 F4F4(探探针)ATTGCGCCGGCATGTAG 114
15、-130 ATTGCGCCGGCATGTAG 114-130(二)操作方法(二)操作方法 1 1采集标本,根据病人的情况可采取局部分泌物,抽取采集标本,根据病人的情况可采取局部分泌物,抽取淋巴结液,羊水,血清,脑脊液。用适量的蒸馏水稀释,淋巴结液,羊水,血清,脑脊液。用适量的蒸馏水稀释,保存于保存于44冰箱。冰箱。2 2标本处理:目的是为了暴露梅毒螺旋体的标本处理:目的是为了暴露梅毒螺旋体的DNADNA,消除标消除标本对本对PCRPCR的抑制物。采用下列处理方法。的抑制物。采用下列处理方法。煮沸法煮沸法;低低速离心法速离心法;碱裂解法碱裂解法.(三)(三)PCRPCR扩增扩增 (四(四)PCR
16、PCR产物分析。产物分析。取取101011反应产物用反应产物用2%2%琼脂糖凝胶电泳;琼脂糖凝胶电泳;SouthernSouthern印迹后印迹后,用寡核苷酸探针用寡核苷酸探针TP5(TP5(以以3232P P作作末端标记末端标记)杂交。双股杂交。双股DNADNA探针杂交,使用大片段探针杂交,使用大片段双股双股DNADNA探针检测探针检测PCRPCR产物,而不用合成的寡核苷产物,而不用合成的寡核苷酸探针酸探针,因为这样可通过标记得到较高、特异的放因为这样可通过标记得到较高、特异的放射活性。射活性。四、脑脊液检查四、脑脊液检查 用于诊断神经性梅毒,包括细胞计数,蛋白用于诊断神经性梅毒,包括细胞计
17、数,蛋白量,量,VDRL试验、试验、PCR检测、胶体金试验等。为检测、胶体金试验等。为除外无症状神经梅毒(二期梅毒有除外无症状神经梅毒(二期梅毒有35%35%的病人脑的病人脑脊液异常),所有梅毒病人凡病期超过一年者均脊液异常),所有梅毒病人凡病期超过一年者均应作脑脊液检查。所有早期胎传梅毒婴儿也应检应作脑脊液检查。所有早期胎传梅毒婴儿也应检查脑脊液以除外中枢神经系统受累的可能。脑脊查脑脊液以除外中枢神经系统受累的可能。脑脊液细胞计数和总蛋白量的增加属非特异性变化,液细胞计数和总蛋白量的增加属非特异性变化,脑脊液脑脊液VDRL试验才是神经梅毒的较可靠诊断依试验才是神经梅毒的较可靠诊断依据。但是,
18、当有活动的神经梅毒存在时,脑脊液据。但是,当有活动的神经梅毒存在时,脑脊液白细胞计数常增高(白细胞计数常增高(WBC5/mm3),),因此,脑因此,脑脊液白细胞计数也常常是判断疗效的敏感指标。脊液白细胞计数也常常是判断疗效的敏感指标。有条件的单位行脑脊液有条件的单位行脑脊液PCR检测,可以快速准确检测,可以快速准确的诊断神经性梅毒。的诊断神经性梅毒。关于梅毒血清反应的假阳性关于梅毒血清反应的假阳性(一)(一)技技术性假阳性:性假阳性:抗原敏感性抗原敏感性过高,血清高,血清标本弄本弄错或溶血或或溶血或细菌菌污染,染,检查室技室技术不熟不熟练。(二)(二)生物学假阳性:生物学假阳性:1 1急性生物
19、学假阳性:急性生物学假阳性:见于麻疹、水痘、于麻疹、水痘、风疹、疹、传染性染性单核核细胞胞增多症、上呼吸道感染、猩增多症、上呼吸道感染、猩红热、亚急性急性细菌性心内膜炎、肺炎球菌菌性心内膜炎、肺炎球菌性肺炎、活性肺炎、活动性肺性肺结核、核、丝虫病、斑疹虫病、斑疹伤寒、寒、锥虫病、回虫病、回归热、钩端端螺旋体、螺旋体、疟疾,但滴度很低,一般在疾,但滴度很低,一般在1 1:8 8以下,当用螺旋体抗原血清以下,当用螺旋体抗原血清FTA-ABSFTA-ABS或或TPHATPHA试验检测,血清反,血清反应阴性。阴性。PCRPCR检测阴性。阴性。2 2慢性生物学假阳性:慢性生物学假阳性:(1 1)非螺旋体
20、抗原血清)非螺旋体抗原血清试验假阳性;假阳性;这些疾病常些疾病常见于自身免疫性疾于自身免疫性疾病,如系病,如系统性性红斑狼斑狼疮、播散性、播散性盘状状红斑狼斑狼疮、自身免疫性溶血性、自身免疫性溶血性贫血、血、进行性系行性系统性硬化症、性硬化症、类风湿性关湿性关节炎、炎、风湿性心湿性心脏病、肝硬化、病、肝硬化、结节性多性多动脉炎、干燥脉炎、干燥综合征、慢性合征、慢性肾炎及海洛因成炎及海洛因成瘾,滴度可达,滴度可达1 1:641641:128128;少数孕;少数孕妇,正常人群假阳性率,正常人群假阳性率为1%-2%1%-2%。在。在7070岁以上高以上高龄老人中有老人中有1%1%出出现假阳性。假阳性
21、。(2)螺旋体抗原血清假阳性;发生率比非螺旋体抗原血清试验少。)螺旋体抗原血清假阳性;发生率比非螺旋体抗原血清试验少。淋病淋 病病因:是由淋球菌所引起的泌尿生殖系统化脓性疾病 流行病学 临床表现 男性淋病 女性淋病 儿童淋病 播散性淋球菌感染 实验室检查:淋球菌培养是金标准防治 男性淋病淋菌性尿道炎 附睾炎 淋菌性前列腺炎 淋菌性咽炎成人淋菌性眼炎淋菌性宫颈炎 急性尿道炎 前庭大腺炎 急性输卵管炎 盆腔炎肝周围炎 女性淋病急性淋菌性尿道炎急性淋菌性尿道炎女性淋菌性尿道炎女性淋菌性尿道炎淋菌性宫颈炎淋菌性宫颈炎淋菌性前庭大腺炎淋菌性前庭大腺炎幼女淋菌性外阴阴道炎幼女淋菌性外阴阴道炎淋病的实验室检
22、查淋病的实验室检查一、涂片检查一、涂片检查革兰氏染色:取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色:取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色,在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双革兰氏染色,在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者,此法阳性率在道炎患者,此法阳性率在90%90%左右,可以初步诊断。左右,可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,阳性率仅为阳性率仅为50-60%50-60%,且有假阳性,因此世界卫生组,且有假阳性,因此世界卫生组织推荐用培
23、养法检查女病人。慢性淋病由于分泌物织推荐用培养法检查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少,阳性率低,因此要取前列腺按摩液,中淋球菌较少,阳性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高检出率。以提高检出率。免疫荧光:通过检测淋球菌外膜蛋白免疫荧光:通过检测淋球菌外膜蛋白I I的单克隆抗的单克隆抗体作直接免疫荧光试验。体作直接免疫荧光试验。淋球菌免疫荧光镜检淋球菌免疫荧光镜检二、二、培养培养检查淋球菌培养是诊断的重要佐证,培养法对症淋球菌培养是诊断的重要佐证,培养法对症状很轻或无症状的男性、女性病人都是较敏感的状很轻或无症状的男性、女性病人都是较敏感的方法,只要培养阳性就可确诊,在基因诊断问世方法,只要
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 传播 疾病 实验室 诊断