肺炎支原体血清学抗体检测的研究进展.pdf
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1、135现代医学与健康研究Modern Medicine and Health Research综述/Review2023 年第 7 卷第 20 期2023 Vol.7 No.20肺炎支原体血清学抗体检测的研究进展吴诗阳,孙加进,杨 州(无锡市第八人民医院检验科,江苏 无锡 214011)【摘要】支原体肺炎为常见疾病,采用血清学抗体检测为实践中常用的检测技术。随着肺炎支原体血清学抗体检测的不断发展,其也成为医疗技术发展的重要表现之一。肺炎支原体血清学抗体检测技术较多,分为传统检测技术和新型检测技术,各项检测技术其操作复杂程度和反应原理不同,在临床中有着不同的诊断价值。肺炎支原体血清学抗体检测中的
2、标志物种类、灵敏度和特异性均不相同,不同病程、不同性别、不同疾病下血清学抗体检测技术的阳性检出率不同,为了降低血清学抗体检测的误差需要多个措施进行佐证。现就肺炎支原体的血清学抗体检测的研究进展进行综述,为临床研究提供参考依据。【关键词】肺炎支原体;血清学抗体检测;酶联免疫吸附法【中图分类号】R725.6 【文献标识码】A 【文章编号】2096-3718.2023.20.0135.04DOI:10.3969/j.issn.2096-3718.2023.20.044作者简介:吴诗阳,大学本科,主管技师,研究方向:临床医学检验技术。肺炎支原体是一类常见的呼吸道病原体,其感染会导致肺炎和其他上呼吸道炎
3、症,具有人群性和季节流行性1。在肺炎支原体感染的诊断和监测中,血清学抗体检测是一种常用方法,且具有着重要的诊断价值,因此被广泛使用。本文主要探讨肺炎支原体血清学抗体检测的研究进展,现综述如下。1 抗原的发现与使用为了提高肺炎支原体感染的诊断准确率,近年来不断有新的肺炎支原体抗原被发现,除了传统的血清学抗体检测方法外,一些特异性的肺炎支原体抗原,如 P1 蛋白、蛋白 I、蛋白 J 等,已被用于开发免疫测定法。1.1 P1 蛋白抗原的发现 P1 蛋白是肺炎支原体的主要抗原之一,具有高免疫原性。通过对 P1 蛋白的研究发现,其在肺炎支原体感染后持续存在,可作为诊断肺炎支原体感染的重要标志物之一2。利
4、用血清学抗体检测方法,可以检测出对 P1 蛋白的抗体水平变化,从而确定肺炎支原体感染的状态。1.2 蛋白 I 和蛋白 J 抗原的应用 除了 P1 蛋白,蛋白 I和蛋白 J 也是用于诊断肺炎支原体感染的重要抗原。基于此,研究人员开发了蛋白 I 和蛋白 J 的免疫测定法,如酶联免疫吸附法和免疫荧光分析法3。酶联免疫吸附法和免疫荧光分析法均使用免疫标记的方法来检测蛋白 I 和蛋 白 J 的抗体水平,为临床提供了辅助诊断肺炎支原体感染的新途径。1.3 多抗原检测方法的应用 多抗原检测是目前多个医院检验科采用的方法,常用的方法是间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法。在临床上,采用两种方法对 P1 蛋白、蛋 白
5、 I 和蛋白 J 等多个抗原及相应的抗体进行检测,可以同时明确出多个抗体的水平变化,提供更全面和准确的诊断结果4。1.4 对肺炎支原体抗原的新鉴定和应用 一些研究还致力于鉴定其他新的肺炎支原体抗原并探索其在血清学抗体检测中的应用。近年来,随着医疗技术水平的逐渐提升,相应的医疗设备应用到科室中,对于肺炎支原体抗原的鉴定也有较大的进步。研究人员发现肺炎支原体的其他特异性蛋白,如 P30、P116 和 P200 等,也可能成为新的血清学抗体检测抗原5。另外,随着肺炎支原体抗原的应用范围不断拓展,使得肺炎支原体抗原的新鉴定技术越来越先进。而进一步的研究还需要对这些抗原进行评估和验证,以进一步完善对肺炎
6、支原体感染的诊断和检测 方法。2 抗体检测方法的诊断价值2.1 传统检测方法的诊断价值 传统的肺炎支原体抗体检测方法主要包括血清学方法和分离培养方法。血清学方法主要是利用抗原抗体反应检测患者血清中的肺炎支原体抗体,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、颗粒凝集法、凝集试验等6。从文献数量中可以看出,对于肺炎支原体抗体检测方法的研究较多,尤其是针对酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法、胶体金法等方面的研究。这些方法虽然具有一定的准确性,但存在操作繁琐、耗时长、需要专业技术人员操作等缺点。分离培养法虽然可以直观地检测到肺炎支原体,但培养周期长,且需要特殊的培养基136现代医学与健康研究Modern Medi
7、cine and Health Research综述/Review2023 年第 7 卷第 20 期2023 Vol.7 No.20和实验室条件,因此应用受限。颗粒凝集法和凝集试验在实际应用中也比较广泛,尤其在医疗条件不发达的地区这两种方法的应用更为广泛。颗粒凝集法是一种快速检测肺炎支原体抗体的方法。该方法通过将肺炎支原体与氧颗粒结合为致敏颗粒,与患者血清中的抗体反应,观察是否出现凝集现象来判断是否存在肺炎支原体感染7。颗粒凝集法具有操作简单、快速、特异性高等优点,但灵敏度相对较低。凝集试验是一种传统的肺炎支原体抗体检测方法,该方法通过将肺炎支原体抗原与患者血清中的抗体反应,观察是否出现凝集现
8、象来判断是否存在肺炎支原体感染。凝集试验操作简单、快速,但存在一定的人为误差,且无法区分是自然感染还是接种疫苗后的免疫 反应8。2.2 新技术的诊断价值2.2.1 蛋白芯片和流式细胞术的诊断价值 近年来,随着技术的进步,出现了新一代高通量技术,如蛋白芯片技术和流式细胞术。蛋白芯片技术的研究起步于 2011年,有学者将蛋白芯片技术和胶体金法应用于肺炎支原体抗体检测中,并对两者的诊断价值进行比较,研究表明,蛋白芯片技术检测的敏感性和特异性均高于胶体金法9。相比之下,目前关于流式细胞术技术的研究不够系统,更多的研究是将流式细胞术应用于肺炎支原体患者外周血 T 淋巴细胞亚群检测中10,而将其应用于肺炎
9、支原体抗体检测中的研究较少,后续可以进一步研究。综上,无论是蛋白芯片技术还是流式细胞术都使对肺炎支原体抗体进行全面和快速的检测成为可能。肺炎支原体血清学抗体检测方法对于疾病诊断和流行病学调查非常重要,然而,单独的一次血清学检测存在漏诊的风险。因此,如何改进检测方法并提高准确度是有必要进一步 探究。2.2.2 免疫印迹技术的诊断价值 免疫印迹技术是一种结合了蛋白质印迹和免疫测定的技术,可以用于检测样品中特异性抗原的存在。该方法通过将抗原特异性抗体转印至膜上,然后对膜进行显色处理,从而检测到特异性抗原的存在。近年来,研究人员将免疫印迹技术应用于肺炎支原体抗体的检测,并开发出了快速、灵敏的试剂盒,为
10、临床诊断提供了便利11。2.2.3 基于纳米材料的方法的诊断价值 纳米材料具有独特的物理化学性质和大的体表面积,为生物分子的固定和检测提供了良好的平台。研究人员利用纳米材料的特性,开发出了多种基于纳米材料的检测方法,如纳米孔测序技术、纳米线阵列等12。基于纳米材料的检测方法具有高灵敏度、高特异性、快速等优点,为临床实践肺炎支原体抗体的检测中提供了新的思路。2.2.4 微流控技术的诊断价值 微流控技术是一种将化学分析过程集成在微米级别的芯片上的技术。该技术可以实现样品前处理、反应和检测的一体化操作,具有快速、高效、自动化等优点。近年来,研究人员将微流控技术应用于肺炎支原体抗体的检测,并开发出了相
11、应的试剂盒和仪器设备,为临床诊断提供了新的选择13。2.2.5 智能诊断系统的诊断价值 随着人工智能和机器学习技术的发展,智能诊断系统开始在医学领域发挥重要作用。基于机器学习的智能诊断系统,通过对大量数据的分析处理,提高抗体检测的准确性和效率。这些系统可以通过对不同特征的分析和处理,实现自动化和智能化的诊断,提高诊断准确率。2.2.6 生物传感器的诊断价值 生物传感器是一种将生物分子识别与信号转换器结合的装置,可实现待测物的快速、灵敏、准确地检测14。近年来,研究人员将生物传感器应用于肺炎支原体抗体的检测,如纳米材料传感器、光学传感器等。这些传感器具有操作简单、灵敏度高、特异性好等优点,为肺炎
12、支原体抗体的检测提供了新的选择。3 血清标志物的研究研究人员不仅追踪肺炎支原体感染的抗体水平变化,还加大了对其他血清标志物的研究,如炎症因子 如白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)和升高的急性期反应蛋白 如 C-反应蛋白(CRP),而这些标志物可以作为辅助诊断指标,提供更准确的肺炎支原体感染评估结果。肺炎支原体血清学抗体检测是诊断肺炎支原体感染的重要方法之一,血清标志物是肺炎支原体血清学抗体检测方法的关键指标,血清标志物的类型、灵敏度、特异性、动态变化等均对临床诊断有着重要研究价值。目前,肺炎支原体血清学抗体检测主要检测的是 IgG和 IgM
13、两种抗体。其中,肺炎支原体 IgM 抗体(MP-IgM)是肺炎支原体感染后产生的特异性抗体,一般在感染后 1 周左右即可检测到,在 34 周后达到高峰,之后逐渐降低15。因此,在一定程度上,MP-IgM 的检测结果可以反映肺炎支原体感染的早期情况。因此,MP-IgM 的动态变化可以反映肺炎支原体感染的病程和治疗效果。然而,MP-IgM 在感染早期可能存在假阴性的问题,这可能会影响重症和(或)难治病例的早期干预。另外一种标志物是肺炎支原体 IgG 抗体(MP-IgG),这种抗体在感染后 48 周达到高峰,并且可以持续很长时间16。MP-IgG 的动态变化可以反映人体的免疫反应情况,并且对于再感染
14、的监测有一定的意义。此外,MP-IgM和MP-IgG联合检测137现代医学与健康研究Modern Medicine and Health Research综述/Review2023 年第 7 卷第 20 期2023 Vol.7 No.20可以提高检测的灵敏度,降低漏诊的风险。非特异性早期IgM 与红细胞 I 抗原反应可产生冷凝集现象,但冷凝集试验的诊断价值尚不明确。4 肺炎支原体血清学抗体检测差异性分析疾病的病程、年龄和其他因素可能会对血清学抗体检测的阳性率产生影响。一般来说,对于一些急性感染疾病,如流感或病毒性上呼吸道感染,血清学抗体检测通常在感染后几天至几周内会出现阳性反应。而对于慢性感染
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