高效液相色谱法快速测定保健品中6种人参皂苷的含量.pdf
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1、Oct.2023 CHINA FOOD SAFETY 53分析检测高效液相色谱法快速测定保健品中 6 种人参皂苷的含量居广琳(福建省产品质量检验研究院,福建福州 350002)摘要:目的:快速高效检测非人参及其加工品为主要原料的保健品中 6 种人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1的含量。方法:以 75%甲醇为提取剂超声提取,采用高效液相色谱法测定。结果:6 种人参皂苷在 0.1 1.0 mgmL-1线性关系良好;人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1在阿拉伯糖粉中的加标回收率分别为 93.1%、95.3%、94.8%、94.1%、98.6%和 93.9%;在力
2、保健牛磺酸功能饮料中的加标回收率分别为 90.8%、94.6%、93.0%、91.7%、98.0%和 92.1%;在蜂胶软胶囊中的加标回收率分别为 91.1%、95.0%、92.3%、92.7%、98.4%和 92.5%。结论:本法能快速高效提取并测定非人参及其加工制品为主要材料的保健品中 6 种人参皂苷的含量。关键词:保健品;人参皂苷;液相色谱Rapid Determination of Six Ginsenosides in Health Products by HPLCJU Guanglin(Fujian Inspection and Research Institute for Pro
3、duct Quality,Fuzhou 350002,China)Abstract:Objective:To quickly and efficiently detect the content of six ginsenosides Rb1,Rb2,Rc,Rd,Re,and Rg1 in health products mainly made from non ginseng and its processed products.Method:The extracts were ultrasonically extracted with 75%methanol as the extracta
4、nt and determined by high performance liquid chromatography(HPLC).Result:The six ginsenosides exhibited good linear relationships within the range of 0.1 mgmL-1 to 1.0 mgmL-1;the recovery rates of ginsenosides Rb1,Rb2,Rc,Rd,Re,and Rg1 in arabinose powder were 93.1%,95.3%,94.8%,94.1%,98.6%,and 93.9%;
5、the recovery rates of Lipovitan taurine functional beverages were 90.8%,94.6%,93.0%,91.7%,98.0%,and 92.1%;the recovery rates of propolis soft capsules were 91.1%,95.0%,92.3%,92.7%,98.4%,and 92.5%.Conclusion:This method can quickly and efficiently extract and determine the content of six ginsenosides
6、 in health products mainly made from non ginseng and its processed products the main materials.Keywords:health products;ginsenoside;high performance liquid chromatography人参皂苷是人参、西洋参等人参属植物中被证实具有增强体质、调节神经、延缓衰老及抗肿瘤等功效的有效成分1-2。其中人参皂苷 Rg1具有调节神经系统、保护神经元细胞的作用3;人参皂苷 Rb1具有促进神经修复,减少神经元损伤的作用4;人参皂苷 Re 具有抑制胰岛素抵抗
7、、调节脂质代谢、抗炎的作用5;人参皂苷 Rd 有抗氧化作用3;人参皂苷Rb2具有降脂降糖、调节心血管系统、维持心脏和血管正常生理功能的作用6;人参皂苷 Rc 有抗氧化和抗炎作用7。本实验以 3 种保健品基质为研究对象,参照保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则(2020 年版)应用高效液相色谱法建立了快速稳定高效检测以非人参及其加工品为主要原料的保健品中 6 种人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1含量的方法8。1材料与方法1.1材料与试剂唐传牌阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料、汤臣倍健蜂胶软胶囊,购自市场。54 食品安全导刊 2023年10月(上)分析检测人参皂苷Rb2
8、(批号CCPE900007,纯度96.0%)、人参皂苷 Rc(批号 CCPE900217,纯度 95.6%)、人参皂苷 Rd(批号 CCPE900216,纯度 95.3%)、人参皂苷Re(批号CCPE901307,纯度98.7%)和人参皂苷Rg1(批号 CCPE900 214,纯度 94.9%),均购自广州佳途科技股份有限公司;人参皂苷 Rb1(批号 1ST400 41,纯度98.7%),购自天津阿尔塔科技有限公司;甲醇(分析纯)、乙腈(色谱纯),购自山东禹王化学试剂有限公司;水为自制超纯水。1.2仪器与设备D3200 高效液相色谱仪,大连依利特分析仪器有限公司;KQ-500DE 数控超声波清
9、洗器,昆山市超声仪器有限公司;ME204 电子天平,梅特勒托利多仪器有限公司;超纯水机,美国密理博公司;多位平行浓缩仪,睿科集团(厦门)股份有限公司。1.3实验方法1.3.1溶液的制备标准品储备溶液的配制:称取人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1标 准 品 于 同 一 容 量 瓶中,用甲醇配制成各组分浓度为 9.92 mgmL-1、10.3 mgmL-1、9.54 mgmL-1、9.59 mgmL-1、9.84 mgmL-1和 9.94 mgmL-1的标准品储备溶液。标准系列溶液配制:精密量取标准品储备液 1.0 mL、2.0 mL、2.0 mL、2.0 mL 和 1.0 m
10、L,置 于100 mL、100 mL、50 mL、25 mL 和 10 mL 容量瓶中,用甲醇稀释并定容至刻度,摇匀,即配成人参皂苷标准系列溶液。人参皂苷标准系列溶液配制浓度如表 1 所示。表 1人参皂苷标准系列溶液配制标准品储备溶液/mL定容体积/mL人参皂苷标准系列溶液浓度/(gmL-1)Rb1Rb2RcRdReRg11.010099.2103.095.495.998.499.42.0100198.4206.0190.8191.8196.8198.82.050396.8412.0381.6383.6393.6397.62.025793.6824.0763.2767.2787.2795.21
11、.010992.01 030.0954.0959.0984.0994.0唐传牌阿拉伯糖粉和力保健牛磺酸功能饮料样品溶液的制备:称取样品 5 g,置于 50 mL 容量瓶中,加入 20 mL 水溶解,超声提取 15 min 后,加 20 mL甲醇继续超声提取15 min,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,离心,取 10 mL 上清液,氮吹浓缩至 1 mL 即得样品溶液。蜂胶软胶囊样品溶液的制备:按上述方法取内容物进行供试品溶液的制备。1.3.2色谱系统条件色 谱 柱:依 利 特 Hypersil 300 C18(250 mm 4.6 mm,5 m);流动相:乙腈-水,洗脱程序见表 2;检测波长:20
12、3 nm;柱温:35;流速:1.0 mLmin-1;进样量:10 L。2结果与分析2.1液相色谱图按 1.3.2 色 谱 系 统 条 件 分 析 人 参 皂 苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1浓 度 为 992.0 gmL-1、1 030.0 gmL-1、954.0 gmL-1、959.0 gmL-1、984.0 gmL-1和 994.0 gmL-1时的标准溶液,基线分离较好。液相色谱图见图 1。表 2梯度洗脱程序时间/min水/%乙腈/%084162082185560406560406601007101007284168584162.2人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re
13、 和 Rg1的线性范围取 1.3.1 配制的人参皂苷标准系列溶液 10 L 进高效液相色谱分析,以人参皂苷浓度(gmL-1)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,结果见表 3。2.3人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re 和 Rg1的回收率称取供试样品各 2 份,按 1.3.1 方法制备样品溶液测定 6 种人参皂苷含量,结果表明阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料及蜂胶软胶囊均不含被测组分。称取 5.031 2 g、5.041 2 g、5.036 4 g、5.112 4 g、5.095 4 g、5.038 7 g、5.098 3 g、5.064 4 g 和 Oct.2023 CHINA FOO
14、D SAFETY 55分析检测5.046 1 g共9份阿拉伯糖粉,称取5.112 4 g、5.064 2 g、5.310 2 g、5.142 1 g、5.010 6 g、5.065 4 g、5.041 5 g、5.210 4 g 和 5.009 4 g 共 9 份力保健牛磺酸功能饮料,称取 5.048 9 g、5.210 5 g、5.131 5 g、5.198 2 g、5.176 6 g、5.077 8 g、5.210 6 g、5.116 2 g 和 5.130 2 g 共 9 份蜂胶软胶囊内容物,分成 3 组分别加入标准品储备溶液 30 L、80 L、200 L,按 1.3.1 方法制备样品
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