葛根总黄酮的水提工艺优化研究.pdf
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1、第9期(总第5 8 3期)2023年9月文章编号:16 7 1-9 6 46(2 0 2 3)0 9 a-0044-03农产品加工Farm Products Processing葛根总黄酮的水提工艺优化研究No.9Sep.张国栋12,王晓彤,聂文娟,黄武军3,徐向荣2(1.江西农业工程职业学院,江西樟树3312 0 0;2.江西仁仁健康产业有限公司,江西樟树3312 0 0;3.仁和集团发展有限公司,江西樟树3312 0 0)摘要:以柴葛根为原料,采用水提的方法,以总黄酮为指标,对葛根总黄酮的提取工艺进行单因素试验和正交优化试验。单因素试验确定了提取时间、葛根颗粒大小、料液比为正交试验的影响因
2、素,正交试验结果表明,在提取时间为10 0 min,料液比1:2 5,葛根颗粒大小0.2 5 cm条件下,葛根总黄酮的质量浓度最高,达到1.2 7 mg/mL。关键词:葛根;总黄酮;水提法;正交试验中图分类号:TS201.2ZHANG Guodong2,WANG Xiaotong,NIE Wenjuan,HUANG Wujun,XU Xiangrong?(1.Jiangxi Agricultural Engineering Vocational College,Zhangshu,Jiangxi 331200,China;2.Jiangxi Renren HealthIndustry Limit
3、ed,Zhangshu,Jiangxi 331200,China;3.Renhe Group,Zhangshu,Jiangxi 331200,China)Abstract:Taking Pueraria lobata(Willd.)as material,total flavonoids and puerarin as the indexes,extraction of totalflavonoids by water was studied with single factor experiment and orthogonal optimization experiment.The sin
4、gle factorexperiment determined that extraction time,particle size of Pueraria lobata and liquid ratio were the influencing factors of theorthogonal experiment.Orthogonal optimization experiment results showed that extraction rate of total flavonoids from Puerarialobata was the highest when extracti
5、on time was 100 min,material liquid ratio was 1:25,and particle size of Pueraria lobatawas 0.25 cm,reaching 1.27 mg/mL.Key words:Pueraria lobata;total flavonoids;water extraction;orthogonal experiment葛根(Pueraria DC)又名葛藤,葛麻叶,甜葛藤,粉葛藤等,是豆科(Laguminos ae)多年生藤本植物。世界上有18 种,我国有十余种。其中,野葛(P.lobata(willd)ohwi)
6、具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻、通经活络、解酒毒等功效,自古以来主作中药,用于外感发热头痛、项背强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热、泄泻、眩晕头痛、中风偏瘫、胸痹心痛、酒毒伤中等 2 。较多学者对葛根主要成分进行了提取、分离和鉴定,发现葛根的成分有如下几类:异黄酮类,包括大豆苷元(大豆素、大豆黄素、黄豆苷元)、大豆苷、葛根素等;葛根苷类,包括葛根苷A、B、C3种;三帖皂苷类,包括以葛根皂苷A、B、C 命名的7 种新型齐墩果烘型皂角精醇、槐二醇、大豆皂醇B、大豆苷醇A等;生物碱及其他化合物类。在葛根的有效成分中,研究的最多的是异黄酮类,其中对葛根素的研究更受关注 3。收稿日期:2 0 2 2
7、-0 8-2 2基金项目:国家重点研发计划重点专项“中药材大品种一葛(葛根、粉葛)的开发”(2 0 17 YFC1702905)作者简介:张国栋(198 2 一),男,硕士,讲师,研究方向为食品生物化学。文献标志码:AStudy on Optimization of Water Extraction Process ofTotal Flavonoids from Pueraria lobatadoi:10.16693/ki.1671-9646(X).2023.09.011低心肌耗氧量、扩张冠状血管、改善正常和缺血心肌的代谢,改善脑循环、周围血管及微循环,抗心律失常、降血糖降血脂、抗肿瘤、抗氧化
8、等作用 48 。由于葛根具有多种药理作用,目前,上市的产品有葛根片、葛根胶囊、葛根口服液和葛根饮料等,拟用葛根提取液进行发酵,制备成葛根酵素,以填补市场上葛根酵素类产品的空白,对葛根水提工艺进行研究,为葛根酵素的生产奠定试验基础。1材料与方法1.1材料与试剂葛根(干制品),江西仁德中药饮片有限公司提供;芦丁(95%),国药集团化学试剂有限公司提供;乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠,均为分析纯,西陇科学股份有限公司提供。1.2仪器与设备研究表明,葛根具有降低血压、减慢心率、降2023年第9期C21-HT2116HM型多功能电磁炉,广东美的生活电器制造有限公司产品;L3型可见分光光度计,上海佑科仪
9、器仪表有限公司产品;SHA-C型水浴恒温振荡器,杭州旌斐仪器科技有限公司产品;SHP-160型生化培养箱,上海鸿都电子科技有限公司产品;HH-4型数显恒温水浴锅,常州亿通分析仪器制造有限公司产品;高速万能粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司产品。1.3试验方法1.3.1葛根总黄酮的测定采用硝酸铝显色法测定葛根提取液中的总黄酮含量9,精密称定5 0 mg芦丁标准品置于5 0 mL烧杯中,用浓度为0.1mol/L的氢氧化钠溶液溶解后转移至2 5 mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀,即可得质量浓度为2 mg/mL的芦丁标准溶液。精密吸取芦丁标准溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL至具塞试管中,
10、分别加入1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0 m L浓度为0.1mol/L氢氧化钠溶液,再加体积分数为30%的乙醇溶液至5 mL,加人的质量分数为5%的亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,静置6 min后,加入质量分数为10%的硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,静置6 min,加人浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液4mL,加0.4mL的水,摇匀,静置15 min,测定其于波长510nm下的吸光度。以吸光度A为纵坐标,浓度C为横坐标,绘制标准曲线,线性拟合得到回归曲线及相关系数。1.3.2提取工艺流程与方法干葛根粉碎过筛浸提一取上清液一分光光度计检测。准确称量5 g干葛根,置人高速粉碎机粉碎、过筛,倒人
11、锥形瓶中加人蒸馏水,将锥形瓶置于数显恒温水浴锅中浸提,取出锥形瓶中提取液,过滤得到滤液,定容至15 0 mL,精密吸取0.5 mL提取液,再加体积分数为30%的乙醇溶液至5 mL,加入质量分数为5%的亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,静置6 min后,加入质量分数10%的硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,静置6 min,加人浓度为1mol/L氢氧化钠溶液4mL,加0.4mL的水,摇匀,静置15 min,测定其于波长510nm下的吸光度,代入标准曲线回归方程,得出黄酮液质量浓度。每个试验重复2 次取平均值。1.3.3单因素试验分析以葛根颗粒大小、提取时间、料液比、提取温度为参数,提取液黄酮质量浓度为指标进
12、行提取,确定主要影响参数。单因素试验分析各因素与水平设计见表1。进行单因素试验分析时,除试验因素的水平按表1进行,其他因素的水平固定为葛根颗粒大小0.5cm,提取时间6 0 min,提取料液比1:2 0,提取张国栋,等:葛根总黄酮的水提工艺优化研究A葛根颗粒大小B提取时间C料液比D提取温度水平/cm10.2520.5030.7541.0051.25温度8 0。1.3.4正交试验分析根据单因素试验结果确定3个影响总黄酮提取的主要因素及各个因素的影响葛根总黄酮得率水平,进行L(34)正交试验。正交试验因素与水平设计见表2。表2 正交试验因素与水平设计水平A提取时间t/minB料液比/g:mLC 葛
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