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1、 年第 卷第 期 中国麻业科学 文章编号:()工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑菌活性朱春晖程菊娥周英解啸黄妃兰孙书娥张德咏(.湖南省农业科学院植物保护研究所湖南 长沙.西双版纳傣族自治州农业科学研究所云南 景洪)摘 要:为了探究工业大麻雌花和雄花提取物对植物病原真菌的抑制作用采用乙醇浸提法对工业大麻云麻 号、云麻 号、云麻 号 个品种的雌花和雄花分别进行提取采用菌丝生长速率法测定工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌、稻瘟病菌 种植物病原真菌的抑菌活性 结果表明:浓度为、/的工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌和稻瘟病菌均有抑制效果 从对辣椒白绢病抑菌浓度来看云麻 号雄花提
2、取物的最低 值为./而云麻 号雄花提取物的最高值达到./对辣椒炭疽病云麻 号雌花提取物的浓度最低值为./而云麻 号雄花的最高值达到./对稻瘟病菌云麻 号雌花提取物浓度最低值为./而云麻 号雄花提取物浓度最高值达到./因此 个品种的工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌、稻瘟病菌 种植物病原真菌均具有抑菌活性关键词:工业大麻花提取物辣椒白绢病菌辣椒炭疽病菌稻瘟病菌中图分类号:.文献标识码:开放科学(资源服务)标识码():收稿日期:基金项目:财政部和农业农村部:国家麻类产业技术体系资助()长沙市自然科学基金()作者简介:朱春晖()女副研究员主要从事作物病害防控研究:.通信作者:张德咏()男研
3、究员主要从事作物病害防控及其互作研究:.(.)(.):(.).:(.)(.).)(.)./.(./)(./).(.).:(./)(./)././.:.(.).:(.)(.).)(.)工业大麻是大麻科()大麻属()一年生草本植物是指四氢大麻酚含量低于.的大麻其植株的化学成分复杂含有多酚类、黄酮类、生物碱类、萜类等大量活性物质具有一定的抗菌性 目前工业大麻的抗菌作用研究主要是针对大肠杆菌、金色葡萄球菌等细菌的拮抗作用针对真菌特别是植物病原真菌的研究甚少 杨帆等的研究表明工业大麻植株的花提取物对大豆疫霉病菌、小麦赤霉病菌和玉米小斑病菌抑制活性比较好 辣椒白绢病是由齐整小核菌(.)侵染所引起的辣椒土传
4、病害主要危害茎基部和根部 辣椒炭疽病是由刺盘孢属和长圆盘孢属侵染所引起的为发生在辣椒上的病害 本研究选取的是辣椒刺盘孢菌(.).)稻瘟病是一类重要的作物病害可引起水稻大幅度减产病原菌为稻梨孢(.)属半知菌亚门真菌 本研究选取 个工业大麻品种云麻 号、云麻 号、云麻 号的雌雄花采用乙醇溶液进行提取分别测试提取液对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌和稻瘟病菌菌丝生长的抑制率探讨工业大麻花提取物对植物病原真菌的抑制效果 材料与方法.材料云麻 号、云麻 号和云麻 号的雌花和雄花均由云南省西双版纳傣族自治州农业科学研究所在勐海试验基地采集提供雄花在始花期采收雌花在盛蕾期采收采集时均在距顶部 处截断采集后晒干备用
5、试验中所用乙醇为 乙醇供试植物病原菌:辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌、稻瘟病菌由湖南省植物保护研究所实验室分离保存.研究方法.工业大麻雌花和雄花活性物质的提取将采集的云麻 号、云麻 号、云麻 号的雌雄花样品晒干、粉碎每份样品各称取 分别加入 的乙醇溶液冷浸()离心(/)真空抽滤滤渣重复提取 次合并滤液减压蒸馏()得到云麻 号、云麻 号、云麻 号的雌雄花提取物避光冷藏备用()中国麻业科学 第 卷.工业大麻花提取物对 种植物病原菌的抑菌活性测定工业大麻花提取物对植物病原菌的活性测定采用菌丝生长速率法 将工业大麻花提取物分别加入 的乙醇溶液配置成不同质量浓度的供试液浓度由低到高分别为、/分别取 加入 温
6、度为 的 培养基中摇匀平均倒入 个直径为 的灭菌培养皿中冷却后即制得终浓度分别为、/的培养基平板 在无菌条件下将培养好的病原菌分别接入直径 的供试菌饼每个菌种设 皿重复 以每 培养基中加入 乙醇溶剂的培养基平板作为空白对照恒温()培养 待对照平板长满后采用十字交叉法量取菌落圈直径并取其平均值作为处理菌落直径计算抑制率运用.软件对数据进行统计分析并采用 新复极差法对抑制率进行差异性检验抑制率(对照菌落直径处理菌落直径)/(对照菌落直径菌饼直径)根据浓度和抑制率数据采用 .统计软件求毒力回归方程和相关系数计算有效中浓度 值 结果与分析.工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑制效果工业大麻花提取物对
7、 种植物病原真菌的抑制效果见表 从表 可以看出辣椒白绢病菌的抑制率随着工业大麻花提取物浓度的升高而升高 当浓度为 /时云麻 号雌花和雄花提取物对辣椒白绢病菌抑制率最低均为.浓度为/时云麻 号雄花提取物对辣椒白绢病抑制率最高为.表 工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌抑制效果 (.)浓度/()抑制率/云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花.注:同列不同小写字母表示差异显著(.)不同大写字母表示差异显著(.)下同从表 可以看出辣椒炭疽病菌的抑制率随着工业大麻花提取物浓度的升高而升高 浓度为/时云麻 号雄花提取物对辣椒炭疽病菌抑制率最低为.浓度为 /时云麻 号雌花提取物对
8、辣椒炭疽病菌抑制率最高为.表 工业大麻花提取物对辣椒炭疽病菌抑制效果 (.).)浓度/()抑制率/云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花.从表 可以看出稻瘟病菌的抑制率随着工业大麻花提取物浓度的升高而升高 浓度为/时云麻 号雄花提取物对稻瘟病菌抑制率最低为.浓度为 /时云麻 号雌花提取物对稻瘟病菌抑制率最高为.综上所述 个不同品种的工业大麻花提取第 期 朱春晖等:工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑菌活性物对 种不同植物病原真菌的抑制浓度具有一定差异 种植物病原真菌的抑制率随着工业大麻花提取物浓度的升高而升高 辣椒白绢病菌各个浓度的抑制率整体要低于辣椒炭疽病
9、菌和稻瘟病菌的 辣椒炭疽病菌和稻瘟病菌相同浓度下抑制率相互间差异较小表 工业大麻花提取物对稻瘟病菌抑制效果 (.)浓度/()抑制率/云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花云麻 号雌花云麻 号雄花.工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑菌毒力工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑菌毒力统计结果见表 由表 可以看出种工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌的抑菌毒力存在差异:云麻 号雄花提取物对辣椒白绢病抑制浓度最低值为./而云麻 号雄花提取物对辣椒白绢病抑制浓度最高值达到了./表 工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌的抑菌毒力 (.)处理毒力回归方程相关系数/()云麻 号雌花.云麻 号雄花.云麻 号雌
10、花.云麻 号雄花.云麻 号雌花.云麻 号雄花.由表 可以看出 种工业大麻花提取物对辣椒炭疽病菌的抑菌毒力有差异:云麻 号雌花提取物对辣椒炭疽病菌抑制浓度最低值为./而云麻 号雄花提取物对辣椒炭疽病菌抑制浓度最高值达到了./表 工业大麻花提取物对辣椒炭疽病菌的抑菌毒力 (.).)处理毒力回归方程相关系数/()云麻 号雌花.云麻 号雄花.云麻 号雌花.云麻 号雄花.云麻 号雌花.云麻 号雄花.由表 可以看出 种工业大麻花提取物对稻瘟病菌的抑菌毒力有差异:云麻 号雌花提取物对稻瘟病菌抑制浓度最低值为./而云麻 号雄花提取物对稻瘟病菌抑制浓度最高值达到了./中国麻业科学 第 卷表 工业大麻花提取物对稻
11、瘟病菌的抑菌毒力 (.)处理毒力回归方程相关系数/()云麻 号雌花.云麻 号雄花.云麻 号雌花.云麻 号雄花.云麻 号雌花.云麻 号雄花.讨论与结论现有研究表明工业大麻提取物对大豆胞囊线虫、南方根结线虫、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、李斯特菌和沙门氏菌等都有抑制效果另有报道在工业大麻提取物中发现具有抑制细胞增殖和促进细胞凋亡且表现出广谱抗肿瘤作用的化合物 本研究选取具有代表性的 种植物病原真菌作为研究对象检测工业大麻花提取物对植物病原真菌的抑菌效果研究表明工业大麻叶提取物对金黄色葡萄球菌和李斯特菌的最低抑菌浓度分别为.、./对大肠杆菌的最低抑菌浓度为./本研究选取的工业大麻花提取物最低浓度为 /时
12、均有抑菌效果其中浓度为 /时对辣椒炭疽病菌的最低抑制率是云麻 号雄花提取物的.对辣椒白绢病菌的最高抑制率是云麻 号雄花提取物的.杨帆等采用溶剂浸提法提取的工业大麻花、叶、茎和根 种不同器官的粗提物对大豆疫霉病菌()、小麦赤霉病菌()和玉米小斑病菌()种病原物均具有一定的抑菌活性其中工业大麻花的提取物对小麦赤霉病菌的抑制活性最佳抑制率可达 因此本研究选取工业大麻花提取物作为研究对象雌花和雄花分别提取比较雌花、雄花提取物的抑菌活性差异 本研究工业大麻花提取物浓度达到 /时对 种植物病原真菌的抑菌率均接近或超过 抑菌活性更高张正海等研究发现工业大麻提取物成分 馏分(石油醚和乙酸乙酯 提取后的馏分)破
13、坏金黄色葡萄球菌、李斯特菌的细胞壁和细胞膜结构导致细胞膜通透性增加内容物和电解质外泄进而影响菌体能量代谢并造成质膜氧化损伤抑制细胞生长最终使细菌生长受到抑制 本研究发现工业大麻花提取物对 种植物病原真菌均有抑制作用为植物源真菌杀菌剂的应用提供了参考 但是本研究中工业大麻花提取物对植物病原真菌起抑制作用的具体成分及抑菌机理尚不清楚有待下一步深入研究参考文献:.():.张正海 董艳 田媛 等.工业大麻叶对金黄色葡萄球菌的抑菌机制.食品与生物技术学报 ():.张正海 董艳 姬妍茹 等.工业大麻叶抑制单增李斯特菌成分初步分离及机理研究.食品研究与开发 ():.张正海 姬妍茹 杨庆丽 等.响应面法优化工
14、业大麻叶抑制金黄色葡萄球菌物质超声提取工艺.中国麻业科学 ():.杨帆 谢洋 隋新 等.汉麻不同器官提取物对植物病原菌的抑制作用.黑龙江大学工程学报 ():.潘宝贵 刘邮洲 王述彬 等.辣椒白绢病病原菌的分离与鉴定.辣椒杂志():.魏野畴 符崇梅 张付平.日光温室蔬菜花卉病虫草害彩色图谱.兰州:甘肃科学技术出版社:.杨勤忠 林菲 冯淑杰 等.水稻稻瘟病抗性基因的分子定位及克隆研究进展.中国农业科学 ():.李悦 李海燕 周圆圆 等.工业大麻秸秆乙醇提取物对大豆胞囊线虫生理生化代谢的影响.中国油料作物学报():.第 期 朱春晖等:工业大麻花提取物对 种植物病原真菌的抑菌活性 .():.张旭 孙宇
15、峰 崔宝玉 等.超临界 萃取汉麻 种大麻酚工艺及其抑菌性研究.化学试剂 ():.郭孟璧 郭蓉 郭鸿彦 等.工业大麻雌株花叶多糖抑菌活性及稳定性分析.食品与生物技术学报 ():.闫佳佳 万璐 姜硕 等.汉麻叶黄酮成分及其抑菌活性分析.中国调味品 ():.扶雅芬.工业大麻叶提取物的抑菌活性及其作用机理.北京:中国农业科学院.():.张正海 董艳 姬妍茹 等.汉麻叶提取物抑菌活性及抑菌稳定性研究.食品安全质量检测学报():.(上接第 页)吴瑞香 杨建春 王利琴 等.应用多元分析法综合评价胡麻材料抗旱适应性.作物杂志 :.党占海 赵蓉英 王敏 等.国际视野下胡麻研究的可视化分析.中国麻业科学 :.黄亚丽 王庆江 郭云龙 等.喷施 种叶面肥对板栗产量和品质的影响.经济林研究 :.崔红艳 胡发龙 方子森 等.灌溉量和灌溉时期对胡麻需水特性和产量的影响.核农学报 :.:.闫志利 孙建军 高俊山 等.旱地油用亚麻氮磷钾平衡施肥指标体系研究.中国麻业科学 :.何丽 张金 杜彦斌 等.栽培因子对胡麻天亚 号产量的影响.应用生态学报 :.中国麻业科学 第 卷