复方当归注射液对牛蛙坐骨神经-腓肠肌活动的影响研究.pdf
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1、实验与实习D0I:10.20037/j.issn.1671-1246.2023.19.24卫生职业教育Vol.41 2023 No.19复方当归注射液对牛蛙坐骨神经一腓肠肌活动的影响研究张云博,刘雨娟*(河西学院医学院,甘肃张掖7 3 40 0 0)摘要:目的通过用不同强度和频率的电流刺激牛蛙离体坐骨神经一腓肠肌标本,了解复方当归注射液对腓肠肌收缩张力、收缩形式和兴奋性的影响。方法用双毁髓法制备坐骨神经一腓肠肌离体标本,在BL一42 0 F生物信息采集系统中,记录滴加0.2 mL复方当归注射液10 min后,腓肠肌收缩波形的变化。结果复方当归注射液可分别降低坐骨神经干产生动作电位和腓肠肌单收缩
2、时的阈强度、半高刺激强度、最适刺激强度(P0.05或P0.01);增强其兴奋性,增加单收缩时的最大、最小收缩张力和平均张力(P0.05或P0.01);同时能降低腓肠肌强直收缩时的最低刺激频率,增强其收缩时的最大、最小张力,且差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。维拉帕米和琥珀胆碱可阻断其对排肠肌单收缩活动的上述作用((P0.05),乙酰胆碱能增强其对腓肠肌单收缩时阈强度和最适刺激强度的作用(P0.05)。结论复方当归注射液可促进坐骨神经干动作电位的传导,提高腓肠肌收缩兴奋性,其机制可能与促进钙离子内流、增加坐骨神经末梢乙酰胆碱(Ach)释放、促进Ach与腓肠肌细胞膜N2受体结合有关。关
3、键词:复方当归注射液;坐骨神经一腓肠肌;收缩活动中图分类号:G424.31文献标识码:B文章编号:16 7 1-12 46(2 0 2 3)19-0 0 7 3-0 5Study on the Effect of Compound Angelica Sinensis Injection on the Activity of BullfrogSciatic Nerve-Gastrocnemius MuscleZHANGYunbo,LIU Yujuan*(Hexi University,School of Medicine,Zhangye City,Gansu Province,China 734
4、000)Abstract:Objective To understand the effect of compound angelica sinensis injection on the contraction tension,contraction formand excitability of the isolated bulfrog sciatic nerve-gastrocnemius muscle specimen by stimulating the current with different intensi-ty and frequency.Methods The isola
5、ted specimens of the sciatic nerve-gastrocnemius muscle were prepared by the double pulp de-struction method.In the BL-42F biological information collection system,the changes of the contraction waveform of the gastrocne-mius muscle were recorded after 10 minutes of dripping O.2 mL compound angelica
6、 sinensis injection.Results Compound angelicasinensis injection could reduce the threshold intensity,semi-high stimulation intensity and optimal stimulation intensity of action po-tential produced by sciatic nerve trunk and single contraction of gastrocnemius muscle respectively(P0.05 or P0.01);Enha
7、nce itsexcitability,increase the maximum,minimum,and average contractile tension during single contraction(P0.05 or P0.01);At the s-ame time,it can reduce the minimum frequency of stimulation during the contraction of gastrocnemius muscle rigidity,and enhancethe maximum and minimum tension during th
8、e contraction,and the difference is statistically significant(P0.05 or P0.01).Verapa-基金项目:2 0 2 2 年甘肃省教育厅大学生创新创业训练计划项目“当归提取物对牛蛙坐骨神经腓肠肌收缩活动的影响研究”(S202210740047)应用效果分析 J.现代实用医学,2 0 2 2,3 4(4):53 6-53 8.21吴平,张雪英.辩论演讲协同角色代入的案例教学在“工程伦理”课程中的应用 J.科教导刊,2 0 2 1(2 9):156-158.作者简介:詹国栋(198 0 一),男,硕士,主治医师。研究方向:神
9、经发育障碍诊治,儿科学实践教学。*通信作者:陈凯云(197 7 一),女,硕士,副主任医师。研究方向:儿科学模拟教育,儿童发育行为障碍诊治。A-73-mil and Suxamethonium chloride could block the above effects on the single contraction activity of gastrocnemius muscle(P0.05),and Acetylcholine could enhance its effects on the threshold intensity and the optimal stimulus in
10、tensity of gastrocnemius muscle sin-gle contraction(P0.05).Conclusion Compound angelica sinensis injection can promote the conduction of the Action potential ofthe sciatic nerve stem and increase the excitability of gastrocnemius muscle contraction.The mechanism may be related to promotingthe influx
11、 of calcium ions,increasing the release of Acetylcholine(Ach)from the sciatic free nerve ending,and promoting the bindingof Ach to the N2 receptor of the gastrocnemius muscle cell membrane.Keywords:Compound angelica sinensis injection;Sciatic nerve-gastrocnemius muscle;Contractile activity肌肉和运动神经纤维,
12、通过研究电流刺激参数和骨骼肌收缩反应的关系,为临床治疗肌萎缩及运动神经纤维损伤提供实验理论依据3-4。制备牛蛙离体排肠肌标本的手术操作步骤简单,室温条件下用任氏液防止组织干燥就能保持其兴奋性。因此,本文以牛蛙离体坐骨神经腓肠肌标本为研究对象,观察在不同强度、频率的电流刺激下,复方当归注射液对牛蛙离体腓肠肌收缩活动和兴奋性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。1材料与方法1.1.实验动物健康成年牛蛙12 只,雌雄不限,体重(50 0+50)g,由张掖市誉诚医药生物科技有限公司提供。1.2试剂与仪器复方当归注射液(规格为2 mL),由福建古田药业有限公司提供;新鲜任氏液,由河西学院医学院生理实验室配
13、制;BL-420F生物信息采集分析系统、张力传感器、神经屏蔽盒等,均由成都泰盟科技有限公司提供。1.3实验方法1.3.1双毁髓法制备坐骨神经一腓肠肌标本将牛蛙固定于蛙板上,杀蛙针通过枕骨大孔垂直进针,斜向上水平捣毁脑组织,再向下垂直捣毁脊髓。通过检查四肢肌张力是否消失判断脑和脊髓的破坏程度,当牛蛙处于脑死亡状态后,用粗剪刀剪除头部、躯干上肢和内脏组织,剥除皮肤组织。将蛙从脊髓中央分离成两半,一半浸泡在任氏液中备用,另一半用蛙足钉将两端固定在木质蛙板上继续分离。向上保留与坐骨神经相连的一段脊柱,向下沿坐骨神经干走向用玻璃分针分离周围组织,剪去其侧肢保留主干结构完整,在膝关节上部留取约3 cm的股
14、骨,剪去膝关节以下的后肢,以玻璃分针游离肠肌,用丝线结扎跟腱处后将其剪断。实验过程中不断将任氏液滴在坐骨神经干和腓肠肌上,防止组织干燥。1.3.2坐骨神经腓肠肌标本兴奋性检查标本制备好后,用锌铜弓检查其反应,保证兴奋性良好。1.3.3数据采集与记录将坐骨神经-排肠肌标本的股骨端固定在神经屏蔽盒中,另一端用细线连接在张力传感器上;将脊柱段放入神经屏蔽盒,坐骨神经干搭在刺激电极上。连接BL-420F生物信息采集分析系统,选择生理学实验一神经肌肉实验一刺激强度与骨骼肌收缩张力的关系、刺激频率与骨骼肌收缩形式的关系。用直流电刺激坐骨神经干,在CH1通道,波宽0.1ms,分别记录不同刺激强度(刺激频率为
15、1Hz、初始刺激强度为0.0 40 V、增益为0.0 0 2 V)和不同刺激频率下(刺激强度为1V,初始刺激频率为1Hz、增益为1Hz),腓肠肌发生收缩活动时的波形。-74-1.3.4给药方法待波形稳定后,先滴加5%复方当归注射液0.1mL,记录给药前后波形的变化;给标本滴加任氏液0.2 mL,静置2 0 min,待波形恢复正常后,滴加0.2 mL维拉帕米(10-molL-),5min后再滴加0.2 mL复方当归注射液,记录波形的变化。1.4数据分析采用SPSS23.0软件对数据进行处理,采用t检验分析给药前后骨骼肌收缩张力的变化,组间比较采用单因素方差分析,P0.05表示差异有统计学意义。2
16、结果2.1 滴加复方当归注射液后,腓肠肌发生单收缩活动时刺激强度的变化与给药前相比,在刺激频率保持1Hz不变的情况下,逐渐增加电流刺激强度(增益为0.0 0 2 V),复方当归注射液可降低使腓肠肌单收缩时的阈强度、半高刺激强度、最适刺激强度,且差异具有统计学意义(P0.05或P0.01),使腓肠肌单收缩时的最大收缩张力、最小收缩张力、平均收缩张力升高,且差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。由此可见,复方当归注射液可降低腓肠肌发生反应的阈强度,提高其发生单收缩反应的兴奋性,也能增强其单收缩时的最大、最小收缩张力(见表1、图1、表2、图 2)。2.2 复方当归注射液对腓肠肌强直收缩的影响
17、与给药前相比,在刺激强度为1V、逐渐增加电流刺激频率(增益为1Hz)的情况下,复方当归注射液能降低排肠肌发生不完全强直收缩和完全强直收缩时所需的刺激频率(P0.05),增加肠肌完全强直收缩过程中的最大收缩张力和最小收缩张力(P0.01),见图3、图4、表3。2.3 维拉帕米+复方当归注射液对腓肠肌单收缩活动的影响腓肠肌发生单收缩时,维拉帕米可阻断复方当归注射液增强肠肌完全强直收缩时最大、最小和平均收缩张力的效应(P 0.0 5),但对复方当归注射液下调腓肠肌发生完全强直收缩时所需的刺激频率的效应无阻断作用,见图5、表4。2.4 琥珀胆碱+复方当归注射液对腓肠肌单收缩活动的影响在排肠肌单收缩反应
18、良好的情况下,加人琥珀胆碱3 min后,收缩反应波形消失变为直线,肉眼观察排肠肌无收缩活动。此时,加人复方当归注射液,10 min后,刺激反应波形依然是平直状态,说明琥珀胆碱可阻断复方当归注射液对离体坐骨神经-排肠肌收缩活动的作用,见图6。2.5 乙酰胆碱(Ach)+复方当归注射液对腓肠肌单收缩活动的影响与单纯给Ach相比,Ach+复方当归注射液可下调排肠肌收缩反应的阈值,降低最适刺激强度(P0.05)。由此可见,Ach与表1复方当归注射液对刺激强度与腓肠肌单收缩关系的影响(xs)Table 1 Effect of compound angelica sinensis injection on
19、 the relationshipbetween stimulation intensity and single contraction of gastrocnemiusUnit:V时间阅强度给药前0.060 0.004给药10 min后0.044 0.002*注:与给药前比较,*P0.05,*P0.01。平均:16.7 440.035.030.025.015.010.00-5.0-10.0-15.0-20.0-25.0-30.0-35.0-40.0-45.0-50.0-55.004.08.012.016.020.024.028.032.036.040.044.048.052.0 56.06
20、0.064.0图1给药前刺激强度与排肠肌收缩张力的变化曲线Figure 1 Curve of change of stimulation intensity and gastrocnemiusmuscle muscle contraction tension before administration表2 复方当归注射液对腓肠肌单收缩张力的影响(xs),单位:gTable 2 Effect of Compound angelica sinensis injection on singleUnit:gcontraction tension of gastrocnemius muscle(xs)时
21、间给药前给药10 min后注:与给药前比较,*P0.05,*P0.01。50.0145.040.035.030.025.015.010.00-10.0-5.01-15.020.0-30.0-25.0-40.0-35.0-45.050.0408.012.016.0频率:12 次/分最大值:50.0 0 g最小值:11.0 3 g平均值:12.6 1g图2 给药10 min后刺激强度与腓肠肌单收缩张力的变化曲线Figure 2 Change curve of stimulation intensity and single contractiontension of gastrocnemius m
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