《微生物的实验室培养》的教学设计.pdf
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1、微生物的实验室培养的教学设计 一、教学目标 1、知识目标:了解有关培养基的基础知识 2、能力目标:掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术 3、情感目标:养成勇于实践、严谨求实的科学态度 二、教学重点、难点 无菌操作技术 三、教学过程 1、配制微生物培养基 向学生提供几种微生物培养基的配方,让学生通过比较分析各种配养基配 方,明确微生物培养基的基本成分包括:碳源、氮源、无机盐和水,有些微生物 还需要某些特殊的生长因子。 计算:根据配方比例,计算100mL牛肉膏蛋白胨固体培养基各成分用量。 称量:准确称取各成分。 溶化:加水加热熔化牛肉膏;加入蛋白胨和氯化钠继续加热;加入琼脂;用
2、蒸馏 水定容到 100mL 。整个过程不断用玻棒搅拌(防止琼脂糊底而导致烧杯破裂) 调 pH :用 1mol/LNaOH溶液调节 pH至偏碱性。 灭菌:将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌; 所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。 倒平板 :待培养基冷却至50左右时在酒精灯火焰附近操作进行。在火焰旁右 手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;左 手将培养皿打开一条缝隙, 右手将培养基倒入培养皿, 立刻盖上皿盖。 待平板冷 却凝固后,将平板倒过来放置。 2、无菌接种 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释 分散到
3、培养基表面。 将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷 却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到消灭 试管口杂菌的目的。 将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。将菌种试管口 再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙,把接种环伸入平板内划35 条平行线,盖上皿盖(不要划破培养基)。灼烧接种环,冷却后从第一区划线末 端开始向第二区域内划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不 要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。 还可以用涂布法接种: 将菌液进行一系列梯度稀释, 并将不同稀释度菌液分 别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时, 即可获得单个细菌 形成的标准菌落。 3、培养观察 将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37的恒温箱中,培养,在 12 小时和 24 小时后,分别观察和记录结果。可安排生物课代表或小组长进行定 期观察,并做好计录,以便及时让其他学生观察到自己的实验成果。
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