石家庄市污泥干化焚烧处理工程.doc
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1、一 实验意义 农药的使用在给农业带来巨大经济效益的同时,其负面效应也日益突出,尤其是农药对食品和环境的污染,并通过生物富集和食物链的传递进入人体,可造成农药残留在人体内蓄积,进而引起各种组织器官发生病变,甚至致癌、致畸、致突变,农药残留问题已成为当今食品安全最主要的问题之一。DNA 是生物体内主要的遗传物质,也是化学物质作用于生物体早期阶段的一个重要的靶标。药物分子与DNA 之间的相互作用模式主要有嵌插结合、沟槽结合和静电结合,其中嵌插结合是形成DNA 加合物最主要的模式,DNA 加合物的形成一旦逃避生物自身的修复,就可成为致突变或致癌的最小因子而被认为是致肿瘤过程的一个重要起始阶段。事实证明
2、,在体内与DNA 发生作用的化学物质都能在一定程度上在体外与DNA 发生作用。具有选择性的沟槽结合和嵌插作用是药物分子与DNA 相互作用研究的重点1 。荧光分析法和吸收光谱法是一种最常用的分析方法,这方面的工作有更多的文献报道2。溴化乙锭(EB)是一种研究DNA的最灵敏的荧光探针之一,关于它们与DNA的键和特性已有详尽的报道,水溶液中EB的荧光量子产率小,当键合到DNA上后,其荧光强度增强,且其激发波长有明显的红移。EB已作为一种典型的平面嵌入剂,用来对比讨论各种荧光分子与DNA的作用方式。通过荧光光谱等研究农药小分子与DNA的相互作用,求得了结合常数,取得了相关信息,从分子水平上探讨了其作用
3、方式。二 研究现状及发展趋势2.1 研究现状相互作用分析的研究目前在国内外都是较为热门的课题,所采用的研究手段主要有:光谱分析、波谱分析、表面等离子体激元共振(SPR)、电化学分析拍j、亲和毛细管电泳分析72(ACE)、原子力显徽镜(AFM)法、量热法等仪器分析方法。其中的光谱法包括荧光分光光度法、紫外可见分光光度法、红外光谱法、圆二色光谱法、拉曼光谱法、x射线衍射等。汪佳蓉,张国文等1采用紫外- 可见光谱法、荧光光谱法并结合溴化乙锭(EB)荧光探针、黏度测定、盐效应、磷酸盐效应和KI 荧光猝灭实验,研究倍硫磷(有机磷杀虫剂)与小牛胸腺DNA 的相互作用。结果发现,DNA 对倍硫磷内源性荧光产
4、生强烈的猝灭作用。李来生2等采用阿霉素荧光探针研究水溶性对一二甲氨甲基一杯芳烃与小牛胸腺DNA相互作用。实验发现:DNA能猝灭阿霉素的荧光。杯幅1胺能与DNA的磷氧负离子强烈作用,并以嵌入与静电位点竞争混合模式影响DNA一阿霉素。宫霞3等利用荧光光谱方法,以溴化乙锭(EB)荧光探针研究家蝇幼虫抗菌肽MDL一1与大肠杆菌染色体DNA的相互作用,探讨其作用模式为沟槽式和嵌入式混合模式。并计算出其结合常数和成键位点数。郑朝华4等利用荧光光谱法,研究左氧氟沙星与DNA间的相互作用模式。小牛胸腺DNA对左氧氟沙星的荧光具有强烈的猝灭作用。经计算得出结合常数和结合位点数,并推断两者之间为沟槽作用模式。张勇
5、5等采用荧光光谱法,利用血卟呤及金属血卟啉对甲氧卞氨嘧啶的识别作用,建立起灵敏的血卟啉分析方法,并求得结合常数和结合位点数。2.2 发展趋势药物的荧光分析法6进展:常用的药物分析方法有重量分析法、滴定分析法、色谱分析法(包括柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、离子交换色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、固相微萃取、高效毛细管电泳等)、光化学分析法(包括红外和紫外 可见分光光度法、荧光光谱法、化学发光法、磷光分析法、原子吸收光谱法、质谱法、共振光散射等)、电化学分析法等 荧光法以其灵敏度高、选择性好、操作简便等优点受到分析工作者的青睐 将荧光光谱分析法应用于药物分析,已在药物有效成分分析鉴定、药物代
6、谢动力学研究、临床药理与药效分析等方面取得长足发展,并广泛应用于生化分析、生物医学、临床分析等领域的痕量分析。常规荧光分析法最早被应用于分析抗疟疾药物奎宁, 随着荧光分析法的发展,其应用范围日益扩大,被广泛用于抗菌素药物、止痛药、镇静剂、止血药等的分析,涉及合成药物、生物药物和天然药物, 由于自身具有发射荧光特性的物质相对较少,并且受到拉曼峰和散射光等背景的干扰,常规荧光分析法在药物分析中的应用受到限制, 为使荧光分析法的应用更加广泛,发展了各类荧光分析方法,如对不发荧光的物质可通过某类化学反应使其转变为适合测定的荧光物质,对荧光较弱的物质可采取荧光增敏分析法,近年来,还发展了各种新型荧光分析
7、技术,如激光诱导荧光法、同步荧光法、导数荧光法、荧光探针法、光化学荧光法、时间分辨荧光法、三维荧光法、偏振荧光法、荧光免疫测定法、荧光成像技术、荧光光纤传感器等, 这些技术的应用加速了各种新型荧光分析仪器的研制,使荧光分析不断朝着高效、痕量、微观和自动化方向发展。随着药学学科的发展,人们对药物分析的要求越来越高,因此必须运用和发展更适当的分析方法来满足药物分析的要求! 今后的发展方向是:探索并提出常规药物荧光分析新方法;与计算机技术紧密结合,研制出自动化程度高、获得和处理信息速度快的荧光分析仪器;发现和合成选择性优良的药物荧光试剂;与其他现代化分析仪器和方法联合使用,以更准确、更灵敏、更专一和
8、更低检测限获得药物及药物与生物大分子相互作用的有关信息。三 实验方案材料与方法3.1 试剂与仪器36-38%的浓盐酸(上海振兴化工厂);Tris试剂(天津市远航化工二厂有限公司);西维因浓度为200g/ml;鲭鱼精 DNA(北京惠泽奥公司产品)用少量纯水稀释,浓度利用=6600L/molcm 来确定,其浓度为7.510-5 mol/L,溶液保存于4的冰箱中备用; 用0.35mlHCl溶液和0.6057gTris试剂混合配成pH=7.4的Tris-HCl 缓冲溶液;2.19 10-2 mol/L 的KCl 溶液;试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。F-7000 型荧光光度计 ;T6 紫外-可见
9、分光光度计。3.2 方法3.2.1 紫外法在紫外比色皿中,分别加入3.0mlTris-HCl 缓冲溶液和30lDNA,3.0mlTris-HCl 缓冲溶液和30l西维因,3.0mlTris-HCl 缓冲溶液和30l西维因和30lDNA,在波长为200-400nm中,分别测定其光谱。3.2.2 直接荧光法在荧光比色皿中,加入3.0ml Tris-HCl 缓冲溶液和200l西维因溶液,混匀。扫描其荧光光谱后,再逐渐加入浓度为DNA 溶液(10l/ 次,共5次),混合均匀,放置5min 后进行荧光光谱测定。3.2.3 盐效应 在荧光比色皿中,加入3.0ml Tris-HCl 缓冲溶液,100l西维因
10、溶液,50lDNA溶液,混匀。扫描其荧光光谱后,再逐渐加入KCl溶液(10l/ 次,共5次),混合均匀,放置5mi n 后进行荧光光谱测定。四 结果与讨论4.1紫外法 由图可知,在pH 7.4 的Tris-HCl 缓冲条件下,测定了7.510-5 mol/L DNA 的紫外吸收曲线,西维因的紫外吸收曲线,西维因与DNA的混合物的紫外吸收曲线。发现DNA的紫外吸收曲线与DNA和西维因吸光度之和的曲线sum有明显的差别,说明西维因和DNA 之间发生了相互作用。图一 西维因,DNA和西维因-DNA的紫外吸收光谱4.2直接荧光法 由图2可知,在pH 7.4 Tris-HCl 缓冲溶液中,西维因具有较强
11、的内源荧光,随着DNA 加入浓度的增大,西维因的荧光强度有规律的猝灭,表明西维因与DNA 发生了相互作用,DNA 对西维因的荧光产生了猝灭效应。图二 DNA存在下西维因的荧光光谱4.3盐效应 加入KCl可知K+对西维因-DNA体系的影响,可判断是否为静电作用。如图3所示,在335.2nm处最高峰和最低峰差值为105.3,差值较大,说明K+对西维因-DNA体系的影响较大,即静电作用也是西维因与DNA间的重要作用方式之一。图3 KCl对西维因-DNA复合物的荧光影响4.4 结论 本实验运用紫外,荧光光谱法并结合盐效应等多种实验方法对西维因与DNA 的相互作用模式进行研究,推断出西维因与DNA以静电
12、方式进行结合,这一研究结果与动物实验(文献11)结果相一致。参考文献1汪佳蓉,张国文等.倍硫磷与DNA 相互作用的光谱法研究J,食品科学。2009年第30卷15期:78-81.2李来生,黄志兵,王宇晓等荧光光谱法研究对一二甲氨甲基一杯(83芳烃与DNA相互作用J光谱学与光谱分析,2004,24(11):78813宫霞,施用晖,乐国伟荧光光谱分析家蝇幼虫抗菌肽与大肠杆菌染色体DNA作用机理J光谱学与光谱分析,2005,25(13):4204234郑朝华,叶宝芬,杜迎翔等左氧氟沙星与小牛胸腺DNA相互作用的荧光光谱法研究(J中国医药工业杂志,2004,35(12):7407435张勇,雷亚春,刘滇
13、生血卟啉及金属血卟啉与甲氧卞氨嘧啶相互作用的荧光光谱研究J光谱实验室,2004,21(3):6096126潘祖亭,关洪亮,原华平,李微,陈果, 荧光光谱法在药物分析中的应用J, 吉首大学学报(自然科学版), 第26卷第3期, 2005年7月.7刘峥,夏之宁等。光谱法在分子之间相互作用研究中的应用J,激光杂志2001年第22卷,第9页。8廖见培,黄杉生, DNA与小分子药物相互作用研究进展J,化学传感器第25卷第l期 ,2 O 0 5年3月.管理资源吧(),提供海量管理资料免费下载!交通设计项目WBS分解与应用摘要:本文针对交通设计行业的WBS运用,分析了项目工作分解结构,提出了交通设计项目工作
14、包六要素;结合具体的运行案例,阐述了WBS分解在定额、预算和决算的一套流程和工作标准;为设计项目管理的人力成本预算管理提供了一种尝试;为降低成本,提高设计项目管理工作的规范性,提供了操作方法和解决途径。 企业推行项目管理,由过去的粗放式管理到精细化管理,将项目管理理论转换到企业的项目管理实践,往往要经过较长的摸索过程。笔者做为交通规划与设计咨询行业的项目管理人员,经过两年多的项目管理运行实践,深切体会到对项目管理理论知识的正确理解,有时需经过实践的反复碰撞才能融会,尤其在具体项目的WBS分解和应用上。 结合交通规划设计项目的特点,为正确理解项目管理中WBS分解的重要性和准确性,把握WBS分解的
15、粒度,制定相应的工作标准,最终加以正确地应用,真正为提高工作效率,降低成本和减少风险提供可靠的支撑,笔者希望行业项目管理工作者能从下文有所借鉴与启发。 下面,笔者就交通设计项目WBS分解与应用,从4个方面并着重在应用层面上加以阐述。 下载自管理资源吧项目管理者联盟文章,深入探讨。1、交通设计项目WBS分解的理论依据 WBS,是work breakdown structure或work breakdown statement的缩写,即工作分解结构。每个项目都可根据一定的原则将之分为一系列的活动,每一活动还可以分为一系列的子活动,一级级的划分直到不能或不需要划分为止。如某种材料,某种设备,某一活动
16、单元等。 项目工作分解结构是由项目阶段及其项目工作包构成。项目工作包是可以测量的工作成果,是指由若干个有关联的不可分割的最小工作单元所组成的某一工作物。项目工作包的名称是名词性的,项目工作包与工作成果完全一致。 本文转自项目管理者联盟项目管理知识体系指南指出:“由工程或设计部门确定的每项具体工作种类所需完成的数量(即图纸张数、电缆米数、钢材吨数,等等),乘上单位生产率(即每张图纸用多少小时、每小时铺多少米电缆,等等)后,就可用来估算活动所需时间”。这里已经明确了项目工作包所包含的各个要素,为交通设计项目WBS分解和及其工作标准的制定,提供了理论依据。 2、交通设计项目WBS分解是项目成本管理的
17、基础 我们知道项目的质量管理、成本管理和时间管理是项目管理的“铁三角”。项目成本管理又是项目管理的核心内容。 项目管理是过程管理,项目成本管理过程是由资源计划过程、成本估计过程、成本预算过程和成本控制过程组成。这四个过程的落角点就是项目管理中的工作分解结构的管理,工作分解结构涉及到资源计划、成本估计、成本预算和成本控制的每一个过程。可见,项目成本管理的重要基础是项目工作分解结构。所以,交通设计项目管理工作只有紧紧抓住WBS分解,才能抓住项目管理的重要环节,并通过建立相应的工作标准进行规范化的实施,从而提高项目的运行质量。 3、交通设计项目WBS分解的项目工作包要素 依据项目管理理论以及两年来的
18、交通设计项目管理工作反复实践,我们对WBS中项目工作包形成了如下共识: 项目工作包的组成要素:由工作单元、工具、工作物等级单价、工作数量、工作单位、定额工时等六个要素组成。 工作单元:不可分割的最小单位工作。由它构成工作包,譬如针对某一张图纸的动作,如设计、复核、审核和审定。工具:为完成某个工作包所使用的设备、用具、软件等。譬如设计项目使用桥梁博士、BID-ROAD等软件设备和全站仪、GPS等测量设备。使用的工具不同,产生的工时不同。 工作物等级:指从事某项具体工作所需要的适宜人力资源等级。工作物等级单价:指完成某项工作单元所需要的适宜人力资源等级所体现的单位价格。其价格不随人力资源等级的变动
19、而变化。工作物是引用工业企业使用的定额概念。设计项目的工作物,也就是具体工作对象,大部分是章节、图纸和表格,还有外业调查和施工期服务的相关内容。确定工作物等级的优点是指导项目经理用合适的员工做合适的工作。违反这个原则出现的质量问题,项目经理要承担一定的风险。各个工作物难度有高有低,理论上分别用最适宜的人力资源等级的员工来完成,既能保证质量,又能保证工期。在项目运行中,员工的资源等级应尽量与工作物等级相匹配或接近,但大多数情况下,不可能与工作物等级完全匹配,高等级的员工从事低等级的工作物或低等级的员工从事高等级的工作物,收入分配应当按照“工作物等级单价”和相应的“定额工时”进行计算。这就好比定岗
20、定薪,是一个道理。 工作数量:指工作单元的数量。譬如道路的长度、涵洞的多少、路面取芯数量等等。 工作单位:指工作单元的量词。譬如KM、KG、页、座、个等等。 定额工时:大多数适宜工作物等级的员工为完成某项工作单元,通过正常努力能够达到或超过的规定工作时间。工具决定工时的长短。 4、交通设计项目WBS分解的项目工作包的运用 在明确了项目工作分解结构和工作包之后,关键是在于运用。依据项目工作包组成要素,制定了三张使用表格。即项目工作包定额表、项目工作包预算表和项目工作包决算表。三张表作用各不相同,互为依据,互相作用。这是设计项目WBS和工作标准的主要体现形式。下面主要以一个项目的部分内容来叙述三张
21、表的使用。 (1) 项目工作包定额表。 一级公路工程可行性研究项目工作包定额表如表1所示。 项目工作包定额表的形成,依据项目预算历史资料和各方面的专家编制。 作用:项目经理在编制项目预算时可以参照同类或类似项目工作包定额表,避免工作包的遗漏;参照使用的工具,确定准确的工时;参照工作物等级,使用合适的人力资源。 在编制项目预算、制作WBS时,首先要说明项目的技术标准及主要数据,譬如:道路等级、公里长度、桥涵数量、是否新建等等。 (2) 项目工作包预算表。 如:省道某公路(某段)工程可行性研究项目,在预算时说明如下技术标准及主要数据:一级公路、推荐路线35KM、比较线17KM、新建、没有预可行性研
22、究参考等(预算表见表2)。 项目工作包预算表的形成:项目经理依据各类项目工作包定额表或参照相近的工作包定额表编制的具体项目。所谓项目工时预算,实际上就是项目工作包内容的有无和项目工作包工作量的多少的预算。 项目管理者联盟,项目管理问题。表格中的系数:反映某个工作单元工作难度程度的指标。譬如有无通用图、是否新开展的工作包、有无风险、是否赶工、是否经常重复做的工作包等。系数的确定,可以先由项目经理自行确定,总结以后可以部分规定。譬如有通用图可以参照的,系数可以确定为0.5;经常重复做的同类工作包系数可以确定为0.9;如果是赶工可以确定为1.2等等。该工程可行性研究项目,是新建项目,没有预可行性研究
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