非小细胞肺癌患者肿瘤组织PA28γ、miR-7-5p的表达水平及临床意义.pdf
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1、基金项目:河北医学科学研究课题(编号:)作者单位:邯郸市中心医院胸外科(邯郸)作者简介:苗玲女()本科主治医师从事非小细胞肺癌的研究通信作者:苗玲 :.非小细胞肺癌患者肿瘤组织、的表达水平及临床意义苗玲 赵之寒 王敏【摘要】目的 探讨非小细胞肺癌()患者癌组织中蛋白酶体激活因子 及微小 ()表达水平与术后生存的相关性 方法 回顾性分析 年 月 年 月间接受手术治疗的 例 患者临床资料使用免疫组化法和 法测定其癌组织及癌旁组织标本中、表达情况并分析其与 患者病理特征的关系 术后随访 个月观察患者生存情况绘制 曲线分析癌组织中、表达对 患者预后的预测效果 结果 免疫组化法检测 组织中 表达水平显著
2、高于癌旁组织 法测定 相对表达量明显低于癌旁组织(.)癌组织中 表达与 呈负相关性(.)表达与肿瘤分化程度、分期、浸润深度及远处转移相关(.)表达与肿瘤病理类型、分化程度、分期、浸润深度及远处转移相关(.)曲线分析显示 表达预测生存率的 为.(:.)表达的 为.(:.)结论 组织中的 及 均存在异常表达情况且均与癌细胞分化程度、分期、浸润深度和远处转移等病理特征密切相关推测其共同参与了 的发生及进展过程可作为 早期诊断和靶向治疗的肿瘤标记物【关键词】非小细胞肺癌蛋白酶体激活因子 临床意义预后【中图分类号】【文献标识码】:./.【】()().(.).(.).(.)(处)标本各 例 纳入标准:()
3、所有研究对象均符合 制定的 诊断标准()完善术前准备术后经病理确诊为()年龄在 岁间者()患者对实验知情且自愿签署授权书 排除标准:()伴其他部位恶性肿瘤患者()伴肺部其他疾病者()临床资料不完整或术后失访患者 本研究经医院伦理委员会批准实施(批号:院审字:)例 患者中男性 例女性 例年龄 岁平均.岁依据国际抗癌联盟美国癌症联合委员会制定的实体瘤 分期第 版:期 例 期 例浸润深度:期 例 期 例分化程度:高分化 例中分化 例低分化 例病理分型:腺癌 例鳞癌 例转移情况:远处转移 例无转移 例.方法.实验试剂兔抗人 多克隆抗体、免疫组化试剂盒 、显色试剂盒 及 修复液购自北京中杉金桥生物 与阴
4、性对照(.)购自上海吉玛公司 试剂、脂质体 购自美国赛默飞世尔公司 引物及荧光定量()试剂盒购自日本 公司.免疫组化染色()法石蜡切片置于烤箱中 二甲苯脱蜡梯度乙醇脱水后行高压喷气 抗原热修复使用 过氧化氢甲醇配剂室温避光修复 封闭处理 滴加一抗(以 稀释)置于 冰箱过夜加二抗(均滴加生物素标记的羊抗兔)后置于烤箱()孵育 擦玻片加辣根酶标记的链酶卵白素工作液置于烤箱再孵育 显色:拭去组织周围液体后滴加 显色剂组织呈棕黄色后蒸馏水终止显色复染:苏木素染色 使用自来水冲洗 次盐酸酒精分化 组织呈粉色后再冲洗 次氨水返蓝后脱水最后封片染色结果判定:选择 个染色明显、无重叠、定位准确的高倍视野()癌
5、细胞、染色强度及染色细胞百分数先按照染色强度计分:无色为 分淡黄色为 分棕黄色为 分棕褐色为 分 再依据阳性细胞百分比评分:阳性细胞占比 计 分两项评分之积为 法总评分:分为“”分为“”分为“”分为“”取 个视野均值由两名资深病理科医师采用双盲法专职阅片再以两人的观察均值为判定结果.技术试验方法 法提纯组织总 将 总 依照反转录试剂盒中的操作步骤反转录成 采用 法采用 试剂盒逆转录试剂盒 逆转录以总 为模板将 通过 逆转录试剂盒合成 利用荧光 仪进行 逆转录加入 无核酸酶水(水)溶解 立即使用或 保存 按 逆转录试剂盒说明书进行 逆转录操作按 试剂盒说明书配制 反应体系 将混合好的 反应液加入
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