肺泡灌洗液基因甲基化联合癌胚抗原、气道径向超声对肺癌的诊断价值.pdf
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1、狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮狮10Yamaguchi T,Ehara S,Shibata A,et al.Acute pulmonary embolismwith high鄄intensity signals on magnetic resonance direct thrombusimaging.J.European Heart Journal鄄Cardiovascular Imaging,2021,22(11):159鄄159.11廖艳洁,尤丽,胡振春.动脉血乳酸、氧合指数、D鄄二聚体对老年重症肺炎患者并发急性呼吸窘迫综合征的
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7、 2(SHOX2)和 RAS 相关区域家族 1A(RASSF1A)基因甲基化联合癌胚抗原(CEA)、气道径向超声在肺癌诊断的价值。方法摇 选取 2019 年 7 月至 2020 年 6 月于佛山市第二人民医院就诊经胸部 CT 提示肺结节或占位患者 114 例,根据病理诊断确认肺癌 62 例(肺癌组),肺良性病变 52 例(对照组)。在气道径向超声定位后收集患者 BALF 样本、外周静脉血,对 BALF 样本进行细胞学检查及实时荧光 PCR 法检测 SHOX2 和 RASSF1A 基因甲基化阳性率,对外周静脉血血清 CEA 水平进行检测。结果摇肺癌组 SHOX2、RASSF1A 基因任一甲基化阳
8、性 40 例(64郾 52%),阴性22 例,对照组任一甲基化阳性2 例(3郾 85%),阴性50 例,差异有统计学意义(P0郾 05);肿瘤直径与肺泡灌洗液甲基化阳性率呈负相关(P0郾 05);23 例肺癌患者肺泡灌洗液 CEA 水平异常 20 例(86郾 96%),CEA 联合任一甲基化阳性 22例(95郾 65%);17 例对照组 CEA 小于 5 ng/ml 的 12 例(70郾 59%),CEA 联合基因甲基化双阴性的 11 例(64郾 71%);49 例肺癌患者气道径向超声可探及明显回音图像,其中任一基因甲基化阳性 34 例(71郾 4%),无探及回音图像有 13 例,其中基因甲基
9、化阴性 8 例(38郾 4%),差异有统计学意义(P0郾 05)。结论摇 肺癌组患者经气道径向超声定位后获取的肺泡灌洗液甲基化阳性率更高。肺泡灌洗液 SHOX2 和 RASSF1A 基因甲基化联合癌胚抗原、气道径向超声有助于肺癌的早期诊断。揖关键词铱摇 矮小同源盒基因 2;RAS 相关区域家族 1A;甲基化;癌胚抗原;肺癌;气道径向超声揖中图分类号铱 R734郾 2摇 摇 摇 揖文献标志码铱 A摇 摇 摇 揖文章编号铱 1672鄄6170(2023)06鄄0095鄄05The valueof SHOX2 and RASSF1A methylation detection in alveolar
10、 lavage fluid combinedwith carcinoembryonic antigen and airway radial ultrasound in the diagnosis of lung cancer摇CHEN Lu,HU Pei鄄cun,CHEN Shao鄄sen 摇(Department of Respiratory and Critical Care Medicine,FoshanSecond People忆s Hospital,Foshan 528000,China)揖Abstract铱摇Objective摇To investigate the value of
11、 short homeobox gene 2(SHOX2)and RAS鄄related region family 1A(RASSF1A)gene methylation detection in broncho alveolar lavage fluid(BALF)combined with carcinoembryonic antigen(CEA)andairway radial ultrasound in the diagnosis of lung cancer.Methods摇 From July 2019 to June 2020,114 patients with pulmona
12、ry nodulesor mass detected by chest CT in our hospital were selected.According to pathological diagnosis,62 patients with lung cancer(lungcancer group)and 52 patients with benign lung lesions(control group)were confirmed.After radial ultrasound positioning of the59摇 实用医院临床杂志 2023 年 11 月第 20 卷第 6 期摇a
13、irway,BALF samples were collected.Peripheral venous blood was also collected.The BALF samples were subjected to cytological ex鄄amination and real鄄time fluorescent PCR method to detect the positive methylation rates of SHOX2 and RASSF1A genes.CEA levels inperipheral venous blood were also measured.Re
14、sults 摇In the lung cancer group,40 cases(64郾 52%)were positive for anymethylation of SHOX2 and RASSF1A genes,and 22 cases were negative methylation.In contrast,there were only 2 cases(3郾 85%)ofpositive methylation of any gene in the control group,and 50 cases of negative methylation.The difference b
15、etween the two groups wasstatistically significant(P0郾 05).The tumor diameter was negatively correlated with the positive rate of methylation in BALF(P0郾 05).In 23 lung cancer patients,there were 20 cases(86郾 96%)with abnormal CEA level and 22 cases(96郾 65%)with any meth鄄ylation positive combined hi
16、gh level of CEA.In 17 controls,there were 12 cases(70郾 59%)with CEA less than 5ng/ml,and 11 cases(64郾 71%)with double negative gene methylation combined low levels of CEA.There were 49 lung cancer patients had obviousechogenic images detected by radial ultrasound,of which 34(71郾 4%)were positive for
17、 any gene methylation,and 13(38郾 4%)werenot detected by echogenic images,of which 8(38郾 4%)were negative for gene methylation(P0郾 05)。见表 1。本研究已通过佛山市第二人民医院临床科研项目伦理委员会审批(编号:KJ2019003)。表 1摇 两组一般资料比较组别n性别(男/女)年龄(岁)BMI(kg/m2)吸烟指数既往病史n(%)慢性阻塞性肺疾病肺结核高血压/冠心病肺癌组6232/3068郾 85依12郾 322郾 80依3郾 15257依3郾 153(4郾 8%
18、)1(1郾 6%)15(24郾 4%)对照组5228/2461郾 65依15郾 320郾 67依3郾 89207依3郾 894(7郾 7%)0(0%)20(38郾 4%)统计量字2=0郾 057t=2郾 79t=4郾 67t=17郾 24字2=1郾 58字2=1郾 264字2=0郾 069P0郾 8120郾 6830郾 8160郾 780郾 620郾 5350郾 9031.2摇 方法摇1.2.1摇 样本采集摇 淤血清样本:抽取入组患者空腹外周静脉血 5 ml,1200 r/min 离心 10 分钟,留存上清液待测;于气道径向超声操作:患者经局麻或全麻后于内镜室进行常规气管镜检查,均经鼻入镜,并
19、根据胸部 CT 提示的病变部位,予气道径向超声分别于各肺亚段进行检测,采集超声图像并标记超声进入深度。盂BALF 样本:气道径向超声定位后,退出超声,将气管镜远端楔在相应肺段管腔,注入37 益生理盐水,灌洗 3 次,每次 20 ml,以负压 13kPa 尽可能吸尽灌洗液,收集约 40 ml 灌洗液,保存待测。1.2.2摇 样本的检测摇淤CEA 的检测:采用酶联免疫法(ELISA)测定血清中 CEA 水平(试剂盒购自金域有限公司),检测值5郾 2 ng/ml 判断为阳性结果。于SHOX2 和 RASSF1A 基因甲基化检测:按照说明书步骤对肺泡灌洗液进行 DNA 提取,DNA 修饰,RT鄄PCR
20、 检测,两基因甲基化检测结果任一项阳性69摇 实用医院临床杂志 2023 年 11 月第 20 卷第 6 期摇即判读为阳性(DNA 提取试剂盒,亚硫酸盐修饰试剂盒,SHOX2 和 RASSF1A 基因甲基化检测试剂盒均购自金域检验公司)。盂气道径向超声阳性结果判读为探及病灶超声图像。榆细胞学检查:根据中华医学会呼吸病学分会 BALF 细胞学检测技术规范9方法,将细胞检查结果分为阴性、可疑、阳性。1.3摇统计学方法摇使用 SPSS 26郾 0 统计软件进行数据分析。计量资料以均数依标准差描述,组间比较采用 t 检验;计数资料以例数(%)描述,组间比较采用卡方检验;相关性分析采用 Pearson
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