九年级数学(上)第三章 证明(三)8.ppt
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1、临床标本的细菌学检验 基本要求 l认真核对: l了解诊断: l联系临床: 正确采集和处理标本 l无菌操作:对无菌或有菌标本不同处理 l盛放容器:无菌容器 l采集时间、部位: l送检时间、方法:及时送检、低温或保温保存 l安全防护: l及时检验和报告: 选择合适的培基养和培养方法 增菌血平板SS MAC/ EMB 巧克力 培养基 SNANYESA备注 血液 骨髓 + 可同时做厌氧、需氧培 养,做菌计 尿液+ 做菌计、需要时做厌氧 粪/肛拭+ 弧菌培养选用碱性蛋白 胨水和TCBS培养基 痰/咽拭+ 直接涂片镜检 脓液 分泌物 + 直接涂片镜检、可同时 做厌氧、需氧培养 生殖道 标本 + 可直接涂片
2、镜检 眼耳口鼻 标本 + 直接涂片镜检 体液+ 直接涂片镜检,可同时 做厌氧、需氧培养 血液和骨髓 l采血时间与次数:采集血培养都应该在使 用在使用抗生素之前进行;对间歇性寒战 ,应该估计寒战或体温高峰时间。 l采血部位:肘静脉或肘动脉 l骨髓采集: l增菌培养:培养基中加入SPS 检测方法和报告 l普通培养:分别做厌氧和需氧培养 l阳性表现: 均匀浑浊,革兰阴性菌 浑浊有绿色,肺炎链球菌 表面有菌膜有绿色荧光,铜绿假单胞菌 下面沉淀,链球菌 溶血,溶血性链球菌 浑浊有胶胨,葡萄球菌 灰白色菌膜,枯草芽孢杆菌 l涂片革兰染色镜检,直接药敏、分离培养 l报告临床 l阴性结果7天报告 检测方法和报
3、告 l特殊培养 脑膜炎奈瑟菌培养:37加5-10%CO2 伤寒或其它沙门菌:接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤 草绿色链球菌:胰酶酪蛋白大豆肉汤,同时做需要、 CO2和厌氧培养 L型细菌:高渗液体培养基,“油煎蛋”菌落 厌氧培养: 真菌培养: 临床意义 l确诊菌血症和败血症 l金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症 l革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症 l草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎 l铜绿、金葡引起烧伤后败血症 尿液的处理 l标本采集: 一般培养采用清洁中段尿。采样前,用肥皂 水或清水清洗外阴,排出尿液前段需丢弃,中 段和后段尿液10-20ml盛装于无菌的容器。 肾盂尿采集法 膀胱穿刺
4、尿采集法 结核菌涂片或培养用24小时尿取沉淀。 检测方法和报告 l直接镜检 -离心沉淀涂片革兰染色 -淋球菌镜检 l假丝酵母镜检 l结核分枝杆菌镜检 检测方法和报告 l分离培养 -普通培养: -淋球菌培养: -厌氧菌培养: -真菌培养: 检测方法和报告 l菌落计数 倾注平皿法: 尿液稀释成1:10、1:100、1:1000, 取此液1ml放入直径9cm灭菌平皿内,同时加入已熔化并 冷至50的培养基与尿混合,待凝固后置35 培养。 定量接种环涂抹法:使用 1ul的定量接种环沾满尿液, 在分离培养基分离培养。生长的菌落数乘以 1000,等于 每毫升尿中的菌数。 l 报告: 革兰阴性菌105cfu/
5、ml, 革兰阳性菌104cfu/ml有临床意义 阴性报告为“48h培养无菌生长” l患者徐某,男,26岁,因烧伤入住 某院烧伤病房等待植皮手术。期间 ,患者烧伤创面有蓝绿色有甜腥气 味的粘稠分泌物渗出,随后患者出 现41高热、呼吸急促、血压下降 、昏迷。临床诊断为败血症休克, 立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对 症支持治疗,同时采集血标本送检 验科微生物室检验并要求做药敏试 验。请问,该患者可能为哪种细菌 感染?血培养将会出现什么现象? 该如何进一步鉴定? l患者周某,男,65岁,结肠癌术后化疗三日后出现高 热,常规应用抗生素治疗无效,遂临床采集血标本送 检验科微生物室,要求血培养鉴定病原菌及药敏
6、试验 。微生物室工作人员血标本经18h培养后,出现均匀混 浊,酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌感 染?如何进一步鉴定? l患者李某,女,57岁,术后留置导尿3d后出现 发热(38以上)、尿痛、排尿困难,查体有 下腹触痛与肾区叩痛,临床初步判断为肾盂肾 炎,病房要求检验科派人协助采集尿液标本送 检。请问如何正确采集标本,并如何进行检验 ? 粪便标本 l自然排便法:挑取脓血、黏液的粪便2-3g于无 菌的纸盒中,或放置于增菌液中送检 l直肠肛拭子法:直接送检或放入运送培养基中 送检 检测方法 直接镜检:针对特殊细菌,如霍乱弧菌、结核、真菌等 -霍乱弧菌:鱼群样排列的革兰阴性菌,动力阳性 -葡
7、萄球菌:金葡菌引起的假膜性肠炎 -结核分枝杆菌: -艰难梭菌:革兰阳性粗大杆菌,无荚膜、有芽孢 -空肠弯曲杆菌:细小、弧形、S形或螺旋形革兰阴性 检测方法 分离培养 -沙门菌及志贺菌:增菌培养或直接接种于SS和MAC、 CB,3718-24h培养,挑取可疑菌落接种KIA/MIU,进 一步做生化和血清凝集试验 -霍乱弧菌:碱性蛋白胨水37增菌6h,挑取菌膜接 种TCBS平板, 37培养16-20h,挑选可疑菌落氧化酶 阳性,多价“O”诊断血清凝集试验 -大肠杆菌培养:挑取脓血、黏液的粪便接种于MAC或 EMB, 37培养18-24h,挑取可疑菌落接种KIA/MIU, 进一步做生化和血清凝集试验
8、-金黄色葡萄球菌培养:接种于高盐甘露醇琼脂, 37培养18-24小时 -副溶血弧菌培养:增菌后接种与弧菌选择性培养基 与SS培养基。 检测方法 l分离培养 -小肠耶尔森培养:接种NYE、MAC及SS,22-25及37 培养,挑取可疑菌落接种KIA/MIU,进一步做生化鉴定 。 -空肠弯曲杆菌:接种弯曲菌培养基,43微需氧培养 24-72h -艰难梭菌培养:取黄色伪膜状粪便,接种于CCFA平板 ,37厌氧培养48h,挑取可疑菌落检测毒素 临床意义 l检测引起腹泻、食物中毒的肠道菌致病菌 l检测肠道正常菌群,预防菌群失调 l患者杨某,女,24岁,2日前到某海滨城市旅 游,并在街边小店食入大量海鲜。
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